Utilisation du modele papillomavirus pour etudier la mise en place de la fourche de replication chez les eucaryotes

• Auteur / Autrice : CHRISTINE DE RACO
• Direction : Philippe Clertant
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Nice

Mots clés

Mots clés contrôlés

Topoisomérase I

Papillomavirus

Résumé

Dans les cellules eucaryotes, la replication du genome est un processus complexe faisant intervenir un grand nombre de proteines dans un espace restreint. L'etude de ce phenomene in vivo est rendue difficile du fait de l'intervention de parametres cellulaires. Les petits virus a adn de la famille des papillomavirus servent de modele pour etudier la replication de l'adn cellulaire ex vivo (dans des cellules en culture) et in vitro. En effet, dans les cellules infectees in vivo, le genome viral present dans le noyau se recouvre d'histones et se comporte comme l'adn genomique. Sa replication a lieu uniquement pendant la phase s du cycle cellulaire sans perturber l'enchainement des phases ; l'infection est latente. Les deux proteines virales e1 et e2 sont necessaires et suffisantes pour permettre la replication du genome des papillomavirus, elles vont recruter les proteines cellulaires indispensables a toute synthese d'adn. Nous avons utilise au laboratoire le papillomavirus bovin de type 1 (bpv1) pour etudier les interactions qui se mettent en place entre les proteines virales e1 et e2 et les proteines de la fourche de replication. Nous avons, dans un premier temps, analyse la mise en place de l'initiateur viral e1 au niveau de l'origine de replication qui est anterieure a la formation du complexe de fourche. Nous avons ensuite documente les interactions qui s'etablissent entre les proteines virales et l'adn polymerase alpha responsable de l'initiation de la synthese d'adn. Nous avons egalement identifie un nouveau partenaire cellulaire pour les proteines virales : la topoisomerase i qui supprime les contraintes dues a l'ouverture de la molecule d'adn. L'etude de ces interactions a permis d'analyser la mise en place du complexe proteique present au niveau de la fourche de replication au moment de l'initiation de la synthese d'adn chez le bpv1.