Anticorps recombinants et immunoconjugués dirigés contre des protéines spécifiques du scorpion : applications à visée thérapeutique et taxonomique

• Auteur / Autrice : MOHAMED MOUSLI
• Direction : Max Goyffon
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Paris, Muséum national d'histoire naturelle
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences de la nature et de l'Homme - Évolution et écologie (Paris ; 1995-....)
• Jury : Président / Présidente : Joseph Schrevel
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Mohamed El Ayeb, Max Goyffon, Hervé Rochat
• Jury : Rapporteur / Rapporteuse : Frédéric Ducancel, Jean-Luc Teillaud

Résumé

Les anticorps recombinants libres ou conjugués constituent une génération de molécules aux propriétés nouvelles qui pourrait revêtir un intérêt particulier dans le cadre de l'immunoneutralisation de toxines de scorpion d'une part, de la systématique et de l'identification des espèces d'autre part. Dans le souci de conjuguer une meilleure efficacité neutralisante et une meilleure tolérance, nous avons construit par génie génétique un fragment variable d'anticorps simple-chaine (scFv) dérive de l'hybridome 4c1, dirige contre la neurotoxine AahII du scorpion androctonus australis hector active contre les mammifères. Le scFv-4C1 produit sous forme soluble dans le périplasme bactérien reconnait la toxine AahII et inhibe les effets pharmacologiques de celle-ci in vitro et in vivo de la même manière que l'anticorps parent. La conservation de l'activité neutralisante du scFv-4C1, sa petite taille, son immunogénicité partiellement réduite et sa d’infusibilité en font à priori une molécule de grand intérêt en immunothérapie anti-scorpionique. Dans une autre perspective, un scFv a été préparé à partir de l'hybridome A102 spécifique de la sous-unité 6 de l'hémocyanine du scorpion androctonus australis et fusionne par voie génétique a un marqueur enzymatique, la phosphatase alcaline (AP) d'Escherichia coli. L'immunoconjugué colorimétrique recombinant produit est bifonctionnel. L'examen au microscope électronique des immuncomplexes formés a montré que la protéine de fusion est produite sous forme d'homodimère qui mime une immunoglobuline entière avec deux sites de reconnaissance antigénique. L'immunoconjugué scFv-A102/AP permet une détection de l'antigène en un temps, une diagnose rapide et fiable de l'espèce androctonus australis à partir d'un prélèvement minimum d'hémolymphe et ne donne aucune réactivité croisée avec d'autres espècesLes anticorps recombinants libres ou conjugués constituent une génération de molécules aux propriétés nouvelles qui pourrait revêtir un intérêt particulier dans le cadre de l'immunoneutralisation de toxines de scorpion d'une part, de la systématique et de l'identification des espèces d'autre part. Dans le souci de conjuguer une meilleure efficacité neutralisante et une meilleure tolérance, nous avons construit par génie génétique un fragment variable d'anticorps simple-chaine (scFv) dérive de l'hybridome 4c1, dirige contre la neurotoxine AahII du scorpion androctonus australis hector active contre les mammifères. Le scFv-4C1 produit sous forme soluble dans le périplasme bactérien reconnait la toxine AahII et inhibe les effets pharmacologiques de celle-ci in vitro et in vivo de la même manière que l'anticorps parent. La conservation de l'activité neutralisante du scFv-4C1, sa petite taille, son immunogénicité partiellement réduite et sa d’infusibilité en font à priori une molécule de grand intérêt en immunothérapie anti-scorpionique. Dans une autre perspective, un scFv a été préparé à partir de l'hybridome A102 spécifique de la sous-unité 6 de l'hémocyanine du scorpion androctonus australis et fusionne par voie génétique a un marqueur enzymatique, la phosphatase alcaline (AP) d'Escherichia coli. L'immunoconjugué colorimétrique recombinant produit est bifonctionnel. L'examen au microscope électronique des immuncomplexes formés a montré que la protéine de fusion est produite sous forme d'homodimère qui mime une immunoglobuline entière avec deux sites de reconnaissance antigénique. L'immunoconjugué scFv-A102/AP permet une détection de l'antigène en un temps, une diagnose rapide et fiable de l'espèce androctonus australis à partir d'un prélèvement minimum d'hémolymphe et ne donne aucune réactivité croisée avec d'autres espèces