Rôle de la phospholipase A2 calcium-indépendante dans le remodelage des phospholipides

= Involvement of calcium-independent phospholipase A2 activities in arachidonic and docosahexaenoic acids redistribution within phospholipids.

• Auteur / Autrice : Hélène Birbes
• Direction : Christian Laugier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Génie des matériaux
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Lyon, INSA
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Interdisciplinaire Sciences-Santé (Villeurbanne ; 1995-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : LBP - Laboratoire de Biochimie et Pharmacologie (Lyon, Rhône1996-2003)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Acide arachidonique

Docosahexaénoïque, Acide

Phospholipases

Résumé

L'objectif de ce travail était de caractériser les phospholipases A2 (PLA2) responsables de la libération de l'acide aracidonique (AA) et docosahexaènoïque (DHA) dans les cellules utérines stromales (UIII) au repos et d'étudier leur participation à l'incorporation de ces deux AG et à leur remodelage ultérieur dans les phospholipides (PL). Nous avons mis. En évidence une voie originale de libération de l'AA et du DHA dans les cellules au repos, qui est activée par les inhibiteurs de PKC et met en jeu une PLA2 Ca2+-indépendante (iPLA2). L'étude des caractéristiques de cette enzyme montre l'existence d'au moins deux isoformes, l'une plasmalogènes sélective, insensible au BEL et partiellement inhibée par le MAFP, l'autre sélective des diacyl-GPL et inhibée par le BEL et le MAFP. Si la participation de ces enzymes à l'incorporation de l'AA et du DHA demeure sujette à discussion, nos résultats démontrent clairement leur rôle dans le remodelage des phospholipides. En effet, le BEL, qui inhibe l'isoforme sélective des diacyl-GPL, supprime totalement le transfert de l'AA des diacyl-GPC vers les diacyl-GPE. Quant au MAFP, qui inhibe partiellement l'activité de l'isoforme plasmalogène sélective, il réduit spécifiquement le transfert de l'AA et du DHA des diacyl-GPC vers les alkénylacyl-GPE. Ces inhibiteurs n'ont pas d'effet sur l'activité des transacylases.

The objective of the present work was to study the mechanisms implicated m the incorporation, remodeling and release of arachidonic acid (AA) and docosahexaenoic acid (DHA) within phospholipids (PL) classes and subclasses. We have shown in Um cells the presence of new pathway of AA and DHA release different from the well described one involving the cytosolic phospholipase A2 (cPLA2). As opposed to the cPLA2, this newly described activity : (1) is not regulated by tyrosine kinase nor by cAMP dependent protein kinase A, (2) is activated by protein kinase C inhibitors , (3) is calcium-independent, (4) appears to be implicated in the basal release of AA and DHA. In addition, substrate and inhibitors specificity studies suggest the presence of two calcium-independent PLA2 (iPLA2) activities in UIII cells; One isoform is plasmalogene-selective, insensitive to BEL, partially inhibited by MAFP, while the other isoform hydrolyse the diacyl suclasses and is inhibited by both, BEL and MAFP. WE have shown in this work that the two isoform play also different roles in the incorporation of AA and DHA as well as in their remodeling within the phospholipid classes. Thus, the major pathway of AA and DHA incorporation into PL involves the BEL-insensitive isoform. This isoform participates in the remodeleing of the plasmalogene subclasses by hydrolysing specially the 1-alkenyl-2-acyl-glycero-3-phosphoethanolamine, while the BEL-sensitive isoform participates in the remodeling of the 1,2-diacyl-glycero-phosphoethanolamine subclasses.