Étude de la régulation transcriptionnelle et de la fonction du gène [alpha]IIb par transgenèse chez la souris

• Auteur / Autrice : Philippe Tropel
• Direction : Muriel Vernet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Université Joseph Fourier (Grenoble ; 1971-2015)

Mots clés

Mots clés libres

Genetique des eucaryotes. Evolution biologique et moleculaire

Souris

Animal transgenique

Hematopoiese

Integrine

Sousunite

Megacaryocyte

Cytodifferenciation

Gene

Expression genique

Modele animal

Thrombasthenie glanzmann

Résumé

Le gene alphaiib code pour la sous-unite alpha de l'integrine alphaiibbeta3. Cette integrine intervient comme recepteur du fibrinogene et du facteur von willebrand au cours de l'agregation plaquettaire. Au niveau medullaire, le gene alphaiib est specifiquement exprime lors de la megacaryocytopoiese et constitue un modele d'etude de la regulation genetique de cette voie de differenciation. Afin d'etudier la regulation transcriptionnelle du gene alphaiib murin, nous avons etabli plusieurs lignees de souris transgeniques. Dans un premier modele, le gene traceur tk a ete place sous le controle d'un fragment de 2,7 kb de sequences promotrice du gene alphaiib. Dans un second modele, le gene tk a ete integre dans le locus alphaiib, sous le controle des sequences regulatrices endogenes. L'analyse de l'expression du gene traceur montre que le fragment de 2,7 kb peut cibler l'activite du transgene dans les progeniteurs hematopoietiques multipotents. Le gene tk insere dans le locus alphaiib, presente un profil d'expression similaire. Ces donnees suggerent que le gene alphaiib est exprime avant l'engagement dans la voie megacaryocytaire, dans les progeniteurs hematopoietiques multipotents. Pour disposer d'un modele d'etude de la fonction de l'integrine alphaiibbeta3, nous avons inactive le gene codant pour la sous-unite alphaiib chez la souris. Les fonctions hemostatiques des animaux nullizygotes sont alterees, ce qui se traduit par une frequence accrue d'incidents hemorragiques. Ce phenotype est correle au niveau plaquettaire a l'abolition de la fonction recepteur du fibrinogene. Les plaquettes issues des souris homozygotes pour la mutation n'interagissent pas avec la fibrine et le fibrinogene, et n'agregent pas en reponse a une stimulation par un agoniste. L'ensemble de ces resultats demontre que les souris nullizygotes constituent un modele animal de thrombasthenie de glanzmann, maladie humaine congenitale affectant la fonction de l'integrine alphaiibbeta3.