Approche moleculaire et phenotypique de la resistance du virus de la varicelle et du zona (vzv) a deux antiviraux : l'aciclovir (acv) et le foscarnet (pfa)

• Auteur / Autrice : BERTRAND VISSE
• Direction : Stéphane Richard
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Paris, EPHE

Résumé

Le vzv est responsable chez les immunodeprimes de zonas persistants et dissemines qui peuvent presenter une resistance clinique au traitement par l'acv et de facon rare, au pfa. La resistance du vzv a l'acv a ete etudiee sur un couple de souches isolees chez un patient ayant une resistance a l'acv, et sur un mutant de laboratoire. La resistance a ete mise en evidence sur le plan phenotypique par la determination de la sensibilite in vitro du vzv a l'acv. Nous avons determine que ces resistances etaient associees a une mutation sur le gene de la tk modifiant la glutamine 303 en codon stop. Nous avons teste la technique d'hma, de sscp et de cflp, sur des produits de pcr recouvrant la totalite du gene de la tk afin de determiner une technique rapide permettant de mettre en evidence des mutations. La resistance du vzv au pfa a ete etudiee sur un couple de souches isolees chez un patient ayant une resistance au pfa ainsi que sur 7 mutants de laboratoire. La resistance a ete mise en evidence par la determination de la sensibilite in vitro du vzv au pfa. D'un point de vue genetique, une mutation sur le gene de l'adn pol du vzv etait toujours associee a la resistance. Nous avons determine que la resistance de la souche isolee chez le patient, etait associee a une mutation qui modifiait l'acide glutamique 512 en lysine. Pour les 7 mutants de laboratoire, nous avons demontre que cette resistance etait associee soit a une mutation dans le domaine ii de l'adn pol (souches vrmor et vrver avec l'arginine 665 modifiee en glycine ; souche vrleb avec la valine 666 modifiee en leucine ; souche vroli avec la glutamine 692 modifiee en arginine), soit a une mutation dans le domaine iii (souche vrabd avec l'arginine 806 modifiee en serine ; souches vrali et vrcha avec la leucine 809 modifiee en serine). Nous avons demontre que la resistance au pfa des mutants de laboratoire etait aussi associee a une diminution de la cinetique de croissance de ces virus en culture cellulaire.