Recherche Avancée

Thèse soutenue

Régulation de l'adhésion cellulaire aux sélectines par la compartimentation golgienne des glycosyltransférases

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Auteur / Autrice : Mourad Zerfaoui
Direction : Assou El Battari
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Médecine. Endocrinologie cellulaire et moléculaire
Date : Soutenance en 1999
Etablissement(s) : Aix-Marseille 2

Résumé

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Sur les cellules cancéreuses, la présence massive des motifs sialyl-Lewis, permet de penser que celles-ci pourraient utiliser un système analogue au processus inflammatoire, pour disséminer à travers l'organisme. En empêchant l'expression des sialyl-Lewis, il serait donc possible de diminuer, voire supprimer, le pouvoir invasif de ces cellules. Mon travail a consisté à étudier les mécanismes moléculaires qui régissent l'organisation intracellulaire des glycosyltransférases, notamment celles impliquées dans la synthèse des ligands des sélectines (sialyl-Lewis). Nos travaux antérieurs ont permis de localiser la β1,6-N-acétylglucosaminyltransférase (C2GnT) dans le Golgi-médian. Dans le présent travail, nous avons identifié le signal d'adressage vers le Golgi de C2GnT et nous l'avons fusionné à deux glycosyltransférases terminales : Ia ST6Gal-I et la FucT I (également appelée HT), afin de les ramener dans un compartiment précoce (celui de C2GnT). Les cellules CHO exprimant la chimère C2-HT, mais aussi l'enzyme HT, ont montré un niveau d'expression des motifs sLeX et une adhérence à la E-sélectine très faible. Ceci montre que la HT et la C2-HT rentrent en compétition avec la α(2,3)-sialyltransférase endogène, empêchant ainsi la synthèse·des sLeX et ll’interaction avec la E-sélectine. Pour ce faire, nous avons mis en place un système d'adhésion qui fait appel à l'autofluorescence de la GFP afin de tester les différentes stratégies visant à inhiber l'interaction des cellules cancéreuses avec la E-sélectine.