Controle neuro-hormonal de la relaxation des cellules musculaires lisses intestinales. Caracterisation des recepteurs et des voies intracellulaires, regulation des recepteurs au cours de la distention intestinale

Neuro-hormonal control of smooth muscle cells relaxation. Characterization of receptors and intracellular pathways, regulation of receptors after intestianl distention

• Auteur / Autrice : Moèz REKIK
• Direction : MICHEL DELUAUX
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Résumé

Le tractus digestif est le siege d'une activite motrice controlee par des voies nerveuses complexes. Au niveau de la cellule musculaire lisse (cml) elle-meme, la regulation de la motricite est complexe puisque celle-ci exprime de nombreux recepteurs pour des neurotransmetteurs et des hormones tels que ceux du vip, de la pth et du cgrp qui relachent les cellulaires. L'objectif de cette these etait d'etudier les recepteurs des neurotransmetteurs nanc responsables de la relaxation du muscle lisse digestif, et plus particulierement, les recepteurs du vip au niveau des cml isolees par dissociation enzymatique a partir de la couche circulaire de l'ileon du cobaye afin 1) d'identifier et de caracteriser les recepteurs mis en jeu, 2) de determiner les voies intracellulaires impliquees et plus particulierement la contribution du no dans ces mecanismes et 3) d'evaluer les modifications de fonction et de regulation de ces recepteurs en reponse a une distension intestinale. Nos travaux ont permis de caracteriser l'effet relachant du vip, de la pth et d'un peptide de structure proche, le pthrp, sur les cml. La stimulation des cml par le vip, la pth ou le pthrp active le systeme adenylate cyclase/proteine kinase ampc dependante (pka). Dans une deuxieme partie, nous avons etudie les voies de signalisation intracellulaires du vip. L'incubation des cml isolees avec les inhibiteurs de la no synthase (nos), inhibe partiellement la relaxation induite par le vip. Le vip relache les cml par l'activation sequentielle de la pka, puis l'activation de la nos, la synthese de no et l'activation de la pkg. Nous avons aussi montre que l'cgrp stimulait uniquement la voie de l'ampc lors de la relaxation des cml isolees a partir de la couche longitudinale alors qu'il stimulait la production d'ampc et de no par les cellules de la couche circulaire. Nous avons ensuite etudie la regulation des recepteurs du vip lors d'une distension de la lumiere intestinale. Deux modeles de distension ont ete utilises in vivo et les cml ont ete isolees a partir de la couche circulaire de la partie distendue. La distension induit une desensibilisation de l'effet du vip et de la pth. L'incubation prolongee in vitro (30 mn) des cml n'ayant subi aucun traitement, avec le vip et la pth reproduit les effets de la distension. La desensibilisation de l'effet du vip est prevenue par la perfusion intraluminale de l'antagoniste du vip in vivo ou par la preincubation prolongee des cml avec ce meme antagoniste in vitro. Nous avons pu demontrer in vitro que cette desensibilisation etait de nature homologue pour les recepteurs du vip. En conclusion, ces travaux nous ont permis de demontrer que les peptides vip, pth, pthrp et le cgrp relachent les cml par un effet myogenique direct. Les voies intracellulaires responsables de cet effet comprennent de maniere sequentielle l'activation de l'adenylate cyclase et la production de no. Les recepteurs du vip sont regules par un phenomene de desensibilisation homogene lors de la distension de l'intestin.