Etude des effecteurs moleculaires de la proteine go au cours de l'exocytose dans les cellules chromaffines

• Auteur / Autrice : Stéphane Gasman
• Direction : Marie-France Bader
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

Dans les cellules neuroendocrines, l'exocytose est un mecanisme controle par des proteines g heterotrimeriques. L'activation d'une proteine go localisee sur la membrane des granules de secretion, inhibe la secretion des catecholamines dans les cellules chromaffines. Cette proteine go pourrait avoir pour fonction d'empecher le declenchement inopine de l'exocytose dans les cellules au repos, par un mecanisme qui reste a etre determine. Le reseau d'actine est un candidat seduisant a la fonction d'effecteur de go car il peut etre considere comme une barriere physique qui empeche la mise en place des granules dans les sites d'exocytose. Afin de confirmer cette hypothese, nous avons etudie le degre d'organisation du cytosquelette en fonction de l'etat d'activation de la proteine go. Nous avons montre que go inhibe la secretion en stabilisant le reseau d'actine. Nous avons ensuite tente de preciser le mecanisme permettant a la proteine go de moduler l'etat d'organisation du reseau d'actine. Les proteines rho ont largement ete impliquees dans l'organisation du cytosquelette. Nos resultats indiquent que rhoa est majoritairement associee aux granules chromaffines. De plus nous montrons que rhoa participe a la sequence d'evenement permettant a go de stabiliser le cytosquelette, tandis que racl semble etre directement implique dans les mecanismes d'exocytose. Il a ete montre que rho est capable d'activer les enzymes regulant le taux de polyphosphoinositides. En utilisant des membranes de granules purifiees, nous avons montre que l'activation de la proteine go stimule l'activite de la phosphatidylinositol-4 kinase associee aux granules chromaffines via l'activation de rhoa. En conclusion, nos resultats suggerent que l'activation de la proteine granulaire go conduit a la stabilisation du reseau cortical d'actine par une cascade moleculaire pouvant aboutir a la synthese locale de phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate, un phospholipide implique dans la regulation de l'organisation du cytosquelette.