Etude des mecanismes de regulation du ph intracellulaire au cours de la differenciation en culture primaire des oligodendrocytes de cervelet de rat

Study of intracellular ph regualting mechanisms during cerebellar rat oligodendrocyte differentiation in primary culture

• Auteur / Autrice : ABDELHAMID BOUSSOUF
• Direction : Anne Feltz
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

Le ph intracellulaire (ph#i) et les mecanismes responsables de sa regulation ont ete etudies par microfluorimetrie de la sonde bcecf au cours des stades successifs de la differenciation en culture primaire des oligodendrocytes du cervelet de rat. Nous avons montre qu'une augmentation de ph#i d'environ 0,15 unite intervient au debut de la differenciation des cellules progenitrices 0-2a (a2b5#+, gd3#+, 04#-) vers la voie oligodendrocytaire. Nos resultats permettent en particulier d'etablir que trois mecanismes distincts assurent la regulation de ph#i des cellules o-2a : un echangeur ci#-/hco#3#-, un echangeur na#+/h#+ et un co-transporteur na#+-hco#3#-. Ces deux derniers mecanismes sont retrouves aux stades ulterieurs de la differenciation : pre-oligodendrocytes (o4#+, galc#-) et oligodendrocytes matures (galc#+). Par contre, ces deux stades n'expriment plus aucune activite d'echange ci#-/hco#3#-. La presence de cet echangeur uniquement dans les cellules o-2a a pour consequence d'y maintenir une valeur moyenne de ph#i de 6,9, significativement plus basse que la valeur de 7,1 mesuree dans les memes conditions experimentales dans les cellules plus matures. Nous avons pu preciser que les cellules progenitrices perdent cet echangeur ct/hco#3#- a un stade de differenciation tres voisin de celui ou elles cessent d'exprimer les marqueurs a2b5 et gd3. Ce stade correspond, par ailleurs, a celui ou les cellules cessent d'incorporer la bromo-deoxy-uridine et cessent donc de se diviser. Le role que peuvent jouer la perte d'expression de l'echangeur ci#-/hco#3#- et l'alcalinisation qui en resulte dans l'arret de la division et dans la stimulation de la differenciation des oligodendrocytes reste a identifier.