Mecanismes moleculaires de la mutagenese sos chez escherichia coli : interactions entre le complexe mutagene umud'c et le polymere reca

Moleculars mecanisms of sos mutagenesis in escherichia coli : interactions between the mutagenic complex umud'c and reca polymer

• Auteur / Autrice : FRANCOIS BOUDSOCQ
• Direction : Raymond Devoret
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Les lesions du genome provoquees par les cancerigenes physiques ou chimiques sont responsables des mutations induites. L'apparition des mutations est avant tout le resultat d'une replication fautive operee par l'adn-polymerase sur un adn portant des lesions. Chez la bacterie ou le mecanisme de la mutagenese est le mieux connu, la proteine reca et le complexe umud'c sont deux facteurs essentiels de la mutagenese. Le polymere reca servirait a presenter le complexe umud'c au niveau de la lesion, celui-ci pourrait alors interagir avec la polymerase et l'aider a poursuivre la synthese a travers la lesion. Nous avons montre recemment au laboratoire que le complexe umud'c etait aussi un inhibiteur de la recombinaison homologue. Dans ce travail de these nous avons tout d'abord voulu savoir si le complexe umud'c etait un inhibiteur direct de la recombinaison. Pour cela nous avons quantifie l'inhibition de la recombinaison en faisant varier les concentrations de la proteine reca ou du complexe umud'c qui ont ete clones sous le controle d'un promoteur finement regule. Dans un deuxieme temps, nous avons selectionne des mutants de la proteine reca insensibles a l'action inhibitrice du complexe umud'c. Ces substitutions, placees sur la structure cristallographique de la proteine reca semblent definir deux domaines putatifs d'interaction avec le complexe umud'c. La quantification des proteines umud' et umuc apres irradiation des cellules a montre la formation tardive du complexe umud'c et une stoechiometrie d'environ un complexe umud'c par discontinuite simple-brin. La recherche d'analogues des proteines umud' et umuc a montre que la proteine umuc avait une certaine similitude avec la sous-unite de la polymerase iii. Le complexe umud'c pourrait constituer un etau alternatif a celui forme par les deux sous-unites de la polymerase iii et favoriser l'elongation du brin neosynthetise au niveau de la lesion.