Application de la spectrometrie de masse a pression atmospherique a l'etude de molecules prohibees dans le cadre du controle antidopage

• Auteur / Autrice : Patrice Garcia
• Direction : Jean-Claude Tabet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

De nos jours, les laboratoires de controle antidopage ont besoin de nouvelles techniques d'analyse afin d'elargir la recherche des molecules prohibees dans les fluides biologiques a un plus large eventail. L'utilisation de la chromatographie en phase liquide couplee a la spectrometrie de masse via une interface a pression atmospherique (api) permet ainsi d'etudier des composes polaires et/ou thermosensibles non analysables par d'autres techniques. Des applications de cette methode sont presentees dans ce memoire aussi bien en electronebulisation (esi) qu'en ionisation chimique a pression atmospherique (apci). Les etudes entreprises ont portees sur trois classes distinctes de composes : (i) le glycopyrrolate (anticholinergique), (ii) les diuretiques thiazidiques et (iii) les corticosteroides de synthese (anti-inflammatoires). Un point important de ce travail a ete de comparer les decompositions des ions generees dans les differentes zones de collision (ecremeur, octopole et cellule de collision) avec une molecule comme le glycopyrrolate afin de comprendre les phenomenes s'y produisant. Un autre aspect fondamental a consiste a mettre en evidence les nombreux mecanismes de fragmentation conduisant a la formation d'ions fragments diagnostiques, dont l'isomerisation d'ions en complexes ion-dipole induit avant leur dissociation. Ce travail a ete realise dans le cas des benzothiadiazides etudies par esi en mode negatif et du glycopyrrolate etudie par esi en mode positif. De plus, l'outil ms/ms utilise dans des modes de balayage particulier (mode ascendant ou perte de neutre) a permis la comprehension de certains mecanismes de dissociation. D'un point de vue analytique, les differentes experiences ainsi realisees ont conduit a une identification des ions caracteristiques de chacune des molecules etudiees de maniere a constituer une base de donnees necessaire a la recherche de ces molecules dans les fluides biologiques preleves a partir de chevaux. L'utilisation de la ms/ms a apporte une specificite et une sensibilite accrue indispensable a la detection de ces composes presents pour la plupart a l'etat de trace. De son cote, l'apci a permis en utilisant le mode ms ou ms/ms de differencier des epimeres comme la dexamethasone et la betamethasone sans separation prealable en chromatographie en phase liquide.