Regulation genetique de la stearoyl coa desaturase hepatique de poulet

• Auteur / Autrice : pascal lefrevre
• Direction : Madeleine Douaire
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie moléculaire et cellulaire
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : École nationale supérieure agronomique de Rennes (1961-2004)

Résumé

L'importance de la stearoyl coa desaturase hepatique (scd1) a ete mise en evidence dans les mecanismes conduisant a la formation du tissu adipeux abdominal du poulet et plusieurs resultats suggerent l'implication du gene lui-meme dans la variabilite du caractere. Dans le but de verifier si l'hypothese d'une regulation essentiellement transcriptionnelle du gene scd1 hepatique etait verifiee ou non chez le poulet, l'etude de la regulation de l'expression de scd1 par des effecteurs hormonaux a ete entreprise. Ensuite, nous avons cherche a identifier des zones genomiques qui pourraient rendre compte d'une difference d'activite de scd1 correlee avec le taux de tissu adipeux des animaux. Pour cela, des regions cis de reponse aux principaux effecteurs de la regulation de l'expression de scd1 ont ete recherchees sur la partie 5 amont du gene. Nous avons etabli que le modele d'hepatocytes en culture primaire issu de poulet en croissance, d'environ 6 semaines, est un modele adapte a l'etude des genes de la lipogenese. Il permet d'eviter l'inconvenient majeur de la culture d'hepatocytes embryonnaires dans lesquels certains genes impliques dans la transduction de signaux hormonaux ne s'expriment pas. Ainsi, les interrogations concernant la difference de role joue par l'insuline sur la regulation des genes de la lipogenese entre les rongeurs et l'oiseau, ont commence a etre levees. En effet, nous avons montre que la regulation positive de l'expression de scd1 par l'insuline est essentiellement transcriptionnelle, ce qui est comparable aux observations faites chez les rongeurs. L'effet du glucagon sur l'expression de scd1 hepatique est egalement transcriptionnel. De plus, nous suggerons un effet du glucagon distinct de celui de l'insuline dans les hepatocytes de poulet. Par des experiences de transfection transitoire, nous avons montre que l'acide arachidonique, l'etya et le clofibrate avaient un effet inhibiteur sur la transcription du gene scd1 de poulet. Il apparait que l'effet du clofibrate sur la transcription de scd1 est oppose entre les especes souris et poulet. L'effet de l'etya sur la transcription de scd1 est plus rapide et plus court que celui de l'acide arachidonique, ce qui suggere que ces deux acides gras de meme structure (20 : 4) agissent par deux voies de regulation differentes. Le fragment de la partie 5 flanquante du gene scd1 compris entre 375 et +125 nucleotides contient les sequences necessaires a l'activite basale du promoteur de ce gene. De plus, les elements cis de reponse a l'insuline, a l'acide arachidonique, a l'etya et au clofibrate sont localises dans cette region. Les 83 nucleotides en 5 de ce fragment sont indispensables a l'activite de ce promoteur. Ils contiennent deux boites caat putatives et sont hautement conserves entre le rat, la souris et le poulet. Ce travail rassemble les premiers resultats concernant la regulation genetique de scd1 hepatique de poulet. Il permet de proposer des orientations pour des investigations futures vers la caracterisation d'elements regulateurs du gene scd1.