Analyse du positionnement et reconnaissance moléculaire de néoglycolipides insérés dans des bicouches phospholipidiques

• Auteur / Autrice : Micaèle Gelhausen
• Direction : Françoise Besson, Bernard Roux
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Lyon 1
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Françoise Besson, Bernard Roux

Mots clés

Mots clés contrôlés

Lectines

Glycolipides

Membranes lipidiques

Liposomes

Glycosyltransférases

Résumé

Les glucides complexes, a la surface des membranes biologiques, agissent comme intermediaires de la communication cellulaire ou comme agents protecteurs et stabilisants des membranes. Afin de modeliser certains de ces phenomenes, differents neoglycolipides ont ete etudies. Leur choix repose sur (1) l'importance de la nature de l'ancre lipidique (residu du cholesterol ou d'alcool a chaines alkyles dissymetriques) pour leur insertion dans des membranes artificielles et (2) le role d'un espaceur (forme de 1 a 7 residus ethoxy) entre l'ancre et une glcnac pour positionner le sucre a l'exterieur de la bicouche lipidique. Tous les neoglycolipides, sauf ceux sans pont avec des chaines de plus de 24 carbones, s'incorporent dans des liposomes dialyses en une population unique, de taille similaire. Pour les derives du cholesterol, le diametre des liposomes diminue quand la taille de l'espaceur augmente. Les neoglycolipides exercent une double influence sur les liposomes en modifiant leur permeabilite (sortie de carboxyfluoresceine) ainsi que leur fluidite (transition de phase des chaines hydrocarbonees). Ces modifications dependent de la taille relative du phospholipide et du neoglycolipide. Le positionnement des neoglycolipides dans les couches phospholipidiques a ete etudie en determinant l'accessibilite de la glcnac des neoglycolipides a deux proteines : une lectine (wga) et une enzyme (galactosyltransferase). Il faut que les neoglycolipides incorpores possedent un pont avec au moins 3 residus ethoxy pour que la wga agglutine les liposomes mixtes. Cette agglutination est accrue lorsque les neoglycolipides possedent un pont avec 4 ou 7 residus ethoxy. Ce positionnement externe a la bicouche phospholipidique des glcnac des neoglycolipides possedant un pont avec au moins 3 residus ethoxy est confirme par spectroscopie ir. Quatre ou 7 residus ethoxy sont egalement necessaires pour que la galactosyltransferase fixe un gal sur la glcnac des neoglycolipides incorpores.