Caractérisations de membranes chimiques et biologiques par mesure d'impédance : Application à l'immunodétection

Characterizations of chemical and biochemical membranes by impedance measurement. Application to immunosensing

• Auteur / Autrice : Sami Ameur
• Direction : Nicole Jaffrezic-Renault
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences. Dispositifs de l'électronique intégrée
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Ecully, Ecole centrale de Lyon
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Laboratoire Ingénierie et fonctionnalisation des surfaces (Ecully, Rhône....-2003)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Impédance électrique

Polyéthylèneglycol

Thiols

Biocapteurs

Résumé

La detection des antigenes est d'une importance fondamentale pour le diagnostic medical. Les immunoessais classiques sont selectifs et sensibles mais necessitent plusieurs etapes successives et se font grace a des marqueurs enzymatiques. Ils sont donc inadaptes a la demande croissante du diagnostic biomedical. Ce travail vise l'elaboration d'un immunocapteur peu couteux, peu encombrant et permettant une detection directe, rapide et facile des antigenes par mesure d'impedance electrochimique. Un immunocapteur est un dispositif analytique dans lequel sont etroitement associes une couche de reconnaissance constituee d'anticorps immobilises et un transducteur qui permet la conversion d'un signal biologique en un signal electrique. On commence par presenter les bases theoriques de la mesure impedimetrique et les methodes de fonctionnalisation developpees puis on expose les resultats de l'immunodetection sur platine. Il s'avere que le systeme utilise est dote de bonnes specificite et sensibilite. Cependant, des pertes rapides de l'activite du capteur se sont parfois manifestees. Ces pertes semblent principalement dues a la degradation rapide des membranes. Le greffage par monocouche apparait comme une voie prometteuse pour resoudre ce probleme. Pour cette raison, des electrodes en or fonctionnalisees par des molecules thiolees ont ete ensuite utilisees. Les anticorps ont ete fixes de facon covalente a la surface des electrodes, soit en les fixant par un agent de couplage approprie a des sams de thiols, soit par une immobilisation en une etape des anticorps reduits. La limite de detection de ces capteurs a ete abaissee jusqu'a quelque pg. Ml#-#1 suite a l'ajout d'un couple oxydo-reducteur agissant comme un amplificateur. Une reponse specifique de l'interaction anticorps-antigene a ete enregistree soit par l'utilisation des sams de thiols acides soit par l'injection du peg dans le milieu de test.