Mesure de lésions oxydatives de l'ADN dans les tissus et les fluides biologiques comme biomarqueurs de stress oxydatif : applications in vivo chez le rat et chez l'homme

Measure of oxidative DNA lesions in tissues and biological fluids as biomarkers of oxidative stress : in vivo applications in rat and human studies

• Auteur / Autrice : Jean-Christophe Garcin
• Direction : Pierrette Cassand
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences des aliments
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Bordeaux 1

Résumé

Dans ce travail, l'utilisation, en tant que biomarqueur de stress oxydatif, de la mesure de bases ou de nucleosides modifies dans l'adn ou dans certains fluides biologiques a ete etudiee. Dans la premiere partie, la mise en place de techniques analytiques sensibles (clhp-ec et cg-sm) a permis de degager deux protocoles de dosage de la 8-oxo-7,8-dihydro-2'-desoxyguanosine (8-oxodguo) et de la 5-hydroxymethyluracile (5-hmura) respectivement dans l'adn et dans l'urine. Ces mesures ont d'abord ete mises en application dans le cadre d'etudes in vivo chez le rat. Les resultats obtenus ont montre que l'administration d'un proliferateur de peroxysome (le clofibrate) pouvait induire la formation de 8-oxodguo au niveau hepatique. De la meme facon, l'administration d'un regime contenant une amine heterocyclique (2-amino-3-methylimidazo-(4,5-f)quinoline) provoque une augmentation du taux de 8-oxodguo dans le foie, correlee a la duree du regime et au taux de cytochrome p-450. En revanche, la mesure de l'excretion urinaire de 5-hmura n'a pas permis de caracteriser les effets observes au niveau des tissus. Les resultats obtenus lors d'une etude clinique chez l'homme ont fait apparaitre des variabilites interindividuelles importantes pour la mesure de la 8-oxodguo dans les lymphocytes et montrent que l'excretion urinaire de 5-hmura est augmentee dans les 24h qui suivent l'administration d'un medicament vasodilatateur (le dipyridamole). Cette etude a egalement permis la mise en place d'un modele experimental pour l'evaluation d'aliments fonctionnels modifiant la flore intestinale. L'ensemble de ce travail montre que la mesure de la 8-oxodguo dans l'adn peut etre un bon indicateur de stress oxydatif mais que la validation biologique de l'excretion urinaire de 5-hmura comme biomarqueur restait a etablir de facon plus precise.