Mécanismes transcriptionnels et post-transcriptionnels contrôlant l'expression du gène de la lipase hormono-sensible

Transcriptional and post-transcriptional mechanisms control hormone sensitive lipase gene expression

• Auteur / Autrice : Jacques Grober
• Direction : Dominique Langin
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pharmacologie moléculaire
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Résumé

La lipase hormono-sensible (lhs) est une enzyme clef du metabolisme lipidique. Exprimee dans le tissu adipeux, elle regule la production d'acides gras. En periode de restriction calorique, l'hydrolyse des triglycerides en acides gras libres couvre la majeure partie des besoins energetiques de l'organisme. Les etudes sur une variation de l'expression de la lhs sont tres peu nombreuses. Pourtant, le caractere limitant de la lhs suggere que toute variation de son expression pourrait avoir une repercussion sur la capacite de mobilisation du tissu adipeux. D'autres isoformes de la lhs sont exprimes dans les tissus steroidogeniques comme les testicules. Mon travail de these a consiste a etudier les mecanismes moleculaires controlant l'expression des lhs adipocytaire et testiculaire. Le traitement d'adipocytes par un analogue stable de l'ampc ou un ester de phorbol entraine une diminution des arnm et de l'activite enzymatique de la lhs. Le promoteur de la lhs adipocytaire humaine a ete clone. Un nouvel exon 5' non traduit contenant le point de debut de transcription a ete caracterise. Differentes constructions de la region promotrice ont ete transfectees dans plusieurs modeles cellulaires. Le promoteur minimal est contenu dans 86 pb. Deux sites d'hypersensibilite a la dnasel sont presents dans cette region ainsi que dans le second intron. Un epissage alternatif du pre-arnm aboutissant a l'exclusion de l'exon du site catalytique a ete identifie. La forme epissee est retrouvee dans la plupart des tissus exprimant la lhs. La proteine est catalytiquement inactive mais reste phosphorylable par la proteine kinase a'. L'epissage alternatif, present dans l'espece humaine, est absent dans les autres especes etudiees. Une region de 247 pb, incluant l'exon episse et 19 pb de la partie 5' de l'intron 6, est responsable de cette specificite. La forme testiculaire de la lhs humaine se caracterise par une region nh2-terminale specifique codee par un exon situe 15 kb en amont du premier exon codant adipocytaire. La region promotrice en amont de l'exon testiculaire a ete etudiee in vivo par transgenese. Les sequences responsables de la specificite d'expression sont contenues dans les 524 premieres pb. Ce travail va permettre une etude plus precise des regulations transcriptionnelle et post-transcriptionnelle du gene de la lhs.