Recherche Avancée

Thèse soutenue

Conception de systemes moleculaires organises et modeles d'enzymes

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Auteur / Autrice : HAI TAO HUANG
Direction : Monique Rivière
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1997
Etablissement(s) : Toulouse 3

Résumé

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Le but de ce travail est l'etude et la conception de systemes organises reproduisant les sites actifs d'enzymes. Nous avons choisi de modeliser l'action de l'alphachymotrypsine, enzyme qui catalyse des reactions d'hydrolyse d'amides et d'esters. Nous avons donc mis au point des systemes catalytiques plurifonctionnels de type micellaire ; ces systemes permettent en effet l'incorporation de groupements fonctionnels et amenent un environnement hydrophobe pour la reaction. Un modele de protease doit : permettre l'association non covalente avec les substrats, accepter les groupes acyles resultant de leur hydrolyse, se desacyler facilement pour regenerer le systeme catalytique initial. Apres une etude bibliographique sur les modeles d'enzymes realises a l'aide de solutions micellaires, ce travail decrit l'elaboration de systemes micellaires cationiques de deux types associant le motif imidazole et le motif hydrate d'aldehyde : - solutions micellaires de bromure de cetytrimethylammonium (ctab) ou sont incorporees diverses molecules portant ces groupes fonctionnels (certaines d'entre elles etant amphiphiles) - systemes co-micellaires constitues a partir de ctab et d'un tensioactif plurifonctionnel. Les activites catalytiques de ces differents systemes ont ete mesurees sur la reaction d'hydrolyse de l'acetate de paranitrophenyle. Les differentes constantes de vitesse catalytiques ont ete determinees et comparees. Des mesures de turnover ont ete effectuees. Un systeme tres simple dont l'activite est 2300 fois superieure a celle du bromure de cetyltrimethylammonium (ctab) a ete mis au point : il associe dans des micelles de ctab un tensioactif a fonction imidazole et le chloral.