Régulation de l'expression génétique en stratégie antisens à l'aide d'oligonucléotides réactifs. Utilisation de molécules hybrides ''oligonucléotide-métalloporphyrine''/ par Victor Duarte

• Auteur / Autrice : Victor Duarte
• Direction : Bernard Meunier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Chimie des biomolécules
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Oligonucléotides

Porphyrines

Acides nucléiques antisens

Résumé

Les oligonucleotides antisens constituent une classe d'agents therapeutiques potentiels, en particulier dans le domaine des antitumoraux et des antiviraux. Ces composes sont capables de reguler selectivement l'expression d'un gene par hybridation specifique sur une sequence d'arn messager ou pre-messager et bloquer l'etape de traduction dans la synthese des proteines. Cette etape d'hybridation peut etre suivie d'une etape de coupure de l'arn cible par action de la rnase h. Une nouvelle approche consiste a utiliser des oligonucleotides porteurs d'une nuclease chimique, c'est le cas des molecules hybrides oligonucleotide-metalloporphyrine. Dans un premier chapitre nous nous sommes interesses a la strategie antisens en general et aux travaux decrits dans la litterature qui ont conduit a la synthese d'oligonucleotides modifies pour resister a l'action des nucleases, augmenter l'affinite vis-a-vis de la cible ou encore pour ameliorer la penetration cellulaire de ces composes. L'application in vitro des oligonucleotides dans le domaine antitumoral montre la regulation selective de certains oncogenes et permet d'identifier le role de ces genes dans la proliferation et la differenciation cellulaire. Dans les chapitres qui suivent nous avons etudie dans un premier temps l'action des molecules hybrides oligonucleotide-metalloporphyrine sur la traduction in vitro d'un arnm. Nous avons ensuite analyse quels etaient les evenements responsables (degradation de l'arnm ou blocage physique) de l'inhibition de la synthese proteique. Dans la derniere partie de ce travail, nous avons evalue en strategie antisens sur la lignee cellulaire sk-br-3, la regulation de la proteine erbb-2 par ces oligonucleotides modifies