Etude physiologique, biochimique et genetique de l'acquisition du fer par le systeme pyoverdine chez pseudomonas aeruginosa

Physiological, biochemical and genetical studies of iron acquisition via pyoverdine in pseudomonas aeruginosa pao1

• Auteur / Autrice : Alain Stintzi
• Direction : Jean-Marie Meyer
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

L'element fer, particulierement insoluble en aerobiose et phs physiologiques, est indispensable a la croissance de p. Aeruginosa. Aussi, afin de satisfaire ses besoin en fer, cette bacterie a developpe un mecanisme de solubilisation et de transport du fer en produisant de puissants chelateurs du fer ferrique appele siderophores : pyoverdine et pyocheline. Le role de la pyoverdine dans l'acquisition du fer in vivo a ete etudie. Des experiences de competition pour le fer entre la transferrine et la pyoverdine ont revele la capacite de la pyoverdine a capter le fer de la ferritransferrine in vitro. L'etude de la virulence de mutants pyoverdine par le modele de la souris brulee a permis d'assigner une fonction de facteur associe de virulence a la pyoverdine. La voie de biosynthese de la pyoverdine est encore inconnue. Ce travail a permis d'identifier une nouvelle region du chromosome de pao1 (region 66-70 mn) impliquee dans la synthese de pyoverdine. Un fragment d'adn de 10,8 kb, comprenant cette nouvelle region, restaure la production d'un pigment jaune-vert fluorescent, nomme pseudoverdine, chez un mutant pyoverdine deficient. La sequence nucleotidique de 6 kb de ce fragment d'adn revele un cluster de 4 phases ouvertes de lecture designees pvcabcd. Le role des produits de ces genes dans la voie de biosynthese de la pyoverdine et pseudoverdine a ete demontre. Une voie hypothetique de biosynthese reliant la pseudoverdine au chromophore de la pyoverdine est proposee. Une phase ouverte de lecture additionnelle nommee ptxr a ete localisee en aval et en orientation opposee a pvcd. Ptxr presente de forte similarite avec des proteines appartenant a la famille des activateurs transcriptionnels de type lysr. Un mutant isogenque de ptxr est pyoverdine deficient. L'etude de l'expression des genes pvc a permis de mettre en evidence une regulation positive par ptxr, pvds et la pyoverdine, et un regulation negative par le fer.