Étude biochimique et caractérisation de facteurs impliqués dans le contrôle de l'état d'adénylation des ARNm maternels de Xénope

Biochemical study and characterization of factors implicated in the control of maternal mrna poly(a) status in xenopus laevis

• Auteur / Autrice : Luc Paillard
• Direction : Howard Beverley Osborne
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Rennes 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

ARN messagers

Foetus -- Croissance

Xénopes

Résumé

Au cours du developpement du xenope, l'expression genetique est regulee principalement au niveau traductionnel par la longueur de la queue poly(a) des arnm. La desadenylation d'un arnm s'accompagne de sa repression traductionnelle, alors que sa polyadenylation s'accompagne de son activation traductionnelle. Dans ce travail, nous avons caracterise des facteurs impliques dans le metabolisme de la queue poly(a) de plusieurs arnm. Nous avons fait subir divers traitements biochimiques a des extraits cytoplasmiques d'oeufs de xenope. Ces traitements ont eu des effets differents sur les deux activites de desadenylation de l'extrait, l'activite responsable de la desadenylation specifique des arnm eg apres la fecondation et l'activite par defaut qui concerne les arnm sans specificite de sequence. De plus, nous avons pu separer ces deux activites par chromatographie. Ces resultats montrent que deux complexes moleculaires distincts sont responsables des deux activites de desadenylation de l'embryon de xenope. Nous avons ensuite purifie et obtenu un adnc codant pour un facteur liant specifiquement la region 3' non traduite des arnm eg. Des anticorps diriges contre un large fragment recombinant de ce facteur nous ont permis de montrer qu'il etait essentiel a l'activite de desadenylation specifique des arnm eg mise en place a la fecondation. Nous avons enfin montre que l'arnm maternel de xenope pp2ac est polyadenyle apres la fecondation et que cette polyadenylation est probablement stimulee par une sequence riche en cytosines localise dans sa region 3' non traduite. Nous avons purifie et obtenu des sequences peptidiques d'un facteur liant specifiquement cet element de sequence. Ce facteur est l'homologue d'une proteine humaine potentiellement impliquee dans la stabilisation de l'arnm -globine. Ces donnees pourraient permettre de comprendre le mecanisme de stabilisation de l'arnm -globine au cours de la differenciation erythrocytaire.