Étude des séquences CIS impliquées dans la désadénylation et la dégradation des ARNm maternels dans l'embryon de xénope

Study of cis sequences implicated in deadenylation and degradation of maternal mrnas in xenopus laevis embryos

• Auteur / Autrice : Yann Audic
• Direction : Howard Beverley Osborne
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Rennes 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Xénopes

ARN messagers

Résumé

Lors de l'ovogenese de xenopus laevis, beaucoup d'arn sont synthetises et stockes dans l'ovocyte. La maturation ovocytaire et les 12 premiers cycles de divisions zygotiques se deroulent quasiment en l'absence de transcription. Le controle de la stabilite et de la traduction des arnm maternels stockes durant l'ovogenese est donc tres important pour la regulation de l'expression genetique. Les arnm de la famille eg sont polyadenyles lors de la maturation ovocytaire, puis ils sont desadenyles rapidement apres la fecondation. Ils persistent dans les embryons a l'etat poly(a) puis sont degrades lors de la transition blastuleenne. La specificite de cette desadenylation est controlee par un element de sequence appele eden. Une proteine (eden-bp) se fixe specifiquement sur cette sequence et est necessaire a la desadenylation des arnm eg. Au cours de cette these, nous avons montre que l'information necessaire et suffisante a la desadenylation de l'arnm eg2 et celle necessaire et suffisante a sa degradation sont colocalisees dans 250 nucleotides de sa region 3' non traduite. L'etude de la stabilite d'arn injectes poly(a)#- ou poly(a)#+, nous a permis de mettre en evidence un mecanisme de degradation specifique des arnm poly(a)#-. Ce mecanisme de degradation est potentiellement capable de degrader les arnm desadenyles a la fecondation ou lors de la maturation ovocytaire. Ainsi, on peut considerer que les informations qui controlent l'etat d'adenylation des arnm maternels sont des elements qui controlent la stabilite des arnm dans les embryons au stade blastula. Afin de caracteriser des elements qui modulent la cinetique de desadenylation dependante des eden, nous avons definie une sequence eden synthetique peu efficace et susceptible de reveler de tels elements activateurs. Ces sequences synthetiques nous ont permis de mettre en evidence l'activation produite sur la desadenylation dans les embryons par un element de sequence (auu)#3 provenant de l'arnm eg1 (cdk2). Nous avons montre que cette sequence (auu)#3 est incapable de promouvoir seule la desadenylation apres la fecondation mais agit en activant la desadenylation dependante des eden. Ces differentes sequences cis sont potentiellement impliquees dans le controle de la stabilite des arnm maternels en favorisant leur degradation dans les embryons au stade blastula.