Thèse soutenue

Caractérisation des ADNc et des gènes codant pour les cathepsines L de crustacés décapodes

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Auteur / Autrice : Christine Le Boulay
Direction : Alain Van Wormhoudt
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques
Date : Soutenance en 1997
Etablissement(s) : Rennes 1

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Résumé

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L'activite des cysteine proteinases apparentees aux cathepsines l a ete recherchee dans la glande digestive de crustaces decapodes. La teneur de cette enzyme varie en fonction de l'espece etudiee (crevette, langoustine, homard) et chez une meme espece en fonction des differents stades de la mue. Une etude immunocytochimique a permis de localiser cette proteine dans les granules de secretion des cellules f de l'hepatopancreas. Le criblage des banques d'adnc extraits des pedoncules oculaires et de l'estomac de la langoustine nephrops norvegicus a permis d'isoler deux clones de 1168 (ncp1) et 1094 (ncp2) paires de bases. Les proteines matures sont composees de 217 et 215 residus. Chez la crevette penaeus vannamei, le criblage effectue sur la banque d'adnc d'hepatopancreas a permis d'obtenir deux clones (pcp1 et pcp2) de 1084 et 1172 nucleotides. Pcp1 et pcp2 codent respectivement pour des preprocathepsines l de 326 et 322 acides amines. Un site unique de glycosylation existe dans la region c-terminale des deux proteines matures. Une analyse des homologies de sequences par la methode de parcimonie montre que les cathepsines l de la langoustine et de la crevette sont beaucoup plus proches de la cathepsine l de rat (61 - 65%) que des cathepsines h et b. D'autre part, une grande similitude est constatee avec les cysteine proteinases du homard h. Americanus (82%). Le gene codant pour la cathepsine l de la crevette p. Vannamei comprend 1793 paires de bases reparties en six exons et cinq introns. L'un d'entre eux est situe en aval du residu catalytique cys#2#5. L'architecture de ce gene est comparable a celle de son homologue chez le rat. Par contre, aucune identite n'est observee avec le gene codant pour la cathepsine l de la drosophile drosophila melanogaster.