La lignee rbe4, modele cellulaire pour l'analyse des mecanismes de differenciation des cellules endotheliales de la barriere hemato-encephalique et pour l'etude pharmacocinetique de substances cytotoxiques a travers cette barriere

• Auteur / Autrice : BOUCHRA EL HAFNY
• Direction : Françoise Roux
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales. Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Nous avons montre que les cellules immortalisees rbe4, dont le phenotype endothelial a ete verifie, expriment des marqueurs specifiques de l'endothelium constituant la bhe, tels que la gamma-glutamyl transpeptidase (ggt), la phosphatase alcaline (pal) et la p-glycoproteine (p-gp). Toutefois, comme dans les cultures primaires dont ces cellules sont issues, le niveau d'expression de ces marqueurs est beaucoup plus faible dans les cultures que dans les capillaires cerebraux, immediatement apres isolement. Nous avons observe que les activites de la ggt et de la pal etaient preferentiellement exprimees dans des cellules infiltrant la monocouche confluante et pouvant se regrouper en ilots ou structures tridimensionnelles. Les activites de ces deux enzymes sont augmentees quand les cellules rbe4 sont en coculture avec des facteurs astrocytaires ou traitees par l'acide retinoique, ligand de la superfamille des recepteurs des steroides. Ces augmentations d'activite peuvent etre associees a une augmentation du nombre et de la taille des structures tridimensionnelles dans lesquelles se trouvent les cellules positives. Une expression de la p-gp dans les cellules rbe4 a pu etre mise en evidence par immunohistochimie et par cytometrie de flux. Cette p-gp est fonctionnelle, capable de maintenir une faible concentration intracellulaire de substances hydrophobes, telles que la colchicine et la vinblastine. Les facteurs astrocytaires induisent une augmentation d'expression et d'activite de la p-gp. L'expression et l'activite de la p-gp sont aussi augmentees par l'acide retinoique. L'action conjuguee des facteurs astrocytaires et de l'acide retinoique permet l'evolution des cellules rbe4 vers un stade plus differencie, se traduisant par une