Etude des interactions entre la proteine n de la souche pv du virus rabique et l'arn viral in vitro
Auteur / Autrice : | ANNE KOUZNETZOFF |
Direction : | Daniel Blangy |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie |
Date : | Soutenance en 1997 |
Etablissement(s) : | Paris 6 |
Résumé
Chez les virus a arn, l'interaction entre les genomes (+) ou () et des proteines virales ou cellulaires controle l'expression des genes. Nous avons developpe des methodes sensibles et precises (retardement en gel, pontage covalent aux uv induits par un laser) pour mesurer ces interactions arn-proteine in vitro, en utilisant comme modele la souche pv du virus rabique. Nous avons etudie la fixation de la nucleoproteine virale (n) a l'extremite 5 du genome (+), phenomene a la base de son encapsidation totale, indispensable pour la multiplication virale. Les 58 premiers nucleotides en 5 forment le site d'interaction optimal. Il se divise en 2 domaines : les 12 premiers nucleotides constituent le site majeur de fixation de la n, de fortes affinite et specificite, suivi par un domaine accessoire riche en adenines. Apres avoir montre l'influence de la structure et l'environnement de la proteine sur ses affinite et specifite pour l'arn viral, la region necessaire et suffisante a l'interaction specifique a ete delimitee. Un peptide (55 acides amines), dans la region la plus conservee des n de rhabdoviridae, a ete directement implique dans la liaison n-arn. Il constitue un bon candidat quant a la definition du site actif de fixation a l'acide nucleique. Outre leur contribution au developpement de techniques et des connaissances des mecanismes regissant la multiplication du virus, ces etudes pourraient deborder du cadre rabique pour interesser l'ensemble des organismes vivants.