Implication de l'adn topoisomerase ii beta dans la cytotoxicite et la resistance cellulaire aux agents anticancereux inhibiteurs d'adn topoisomerase ii

Implication of topoisomerase ii beat in the cytotoxicity and cellular resistance to anticancer agents inhibitors of topoisomerase ii

• Auteur / Autrice : SOPHIE DEREUDDRE
• Direction : Alain Jacquemin-Sablon
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

La lignee cellulaire dc-3f/9-oh-e, selectionnee pour sa resistance a la 9-oh-ellipticine a partir d'une lignee de cellules de poumon de hamster chinois (dc-3f), presente une resistance croisee (superieure a 100 fois) aux inhibiteurs de l'adn topoisomerase ii. Grace au clonage et au sequencage des cdnas codant pour l'adn topoisomerase ii beta des lignees dc-3f et dc-3f/9-oh-e, nous avons pu mettre en evidence une mutation non sens en position 1710 du cdna codant pour l'adn topoisomerase ii beta de la lignee dc-3f/9-oh-e qui convertit un codon trp (tgg) en un codon stop (tga). Cette mutation conduit a la disparition de l'adn topoisomerase ii beta dans les cellules resistantes. Afin d'analyser le role de la disparition de cet enzyme dans le phenotype de resistance des cellules dc-3f/9-oh-e, nous avons restaure dans ces cellules une quantite normale et une activite catalytique normale adn topoisomerase ii beta. Cette restauration conduit a une restauration de l'induction des complexes de clivage et a une reversion du phenotype de resistance tres variable selon le type d'agent etudie. Ces resultats demontrent que l'adn topoisomerase ii beta est une cible pharmacologique in vivo de ces agents et qu'elle est impliquee dans leur cytotoxicite. Par ailleurs, le m-amsa apparait comme la cible preferentielle de l'adn topoisomerase ii beta dans le systeme cellulaire etudie. Enfin, la disparition de l'adn topoisomerase ii beta contribue au phenotype de resistance de la lignee dc-3f/9-oh-e aux inhibiteurs d'adn topoisomerase ii etudies. En accord avec des experiences similaires conduisant a la transfection des cellules dc-3f/9-oh-e avec l'adn topoisomerase ii alpha, d'autres alterations genetiques sont impliquees dans le phenotype de resistance.