La transcetolase et la fructose-1,6-bisphosphate aldolase : outils complementaires pour la synthese enzymatique de monosaccharides a partir de 3,4-dihydroxybutyraldehydes

Transketolase and fructose-1,6-bisphosphate aldolase : complementary touls for monosaccharides syntheses from 3,4-dihydroxybutyraldehydes

• Auteur / Autrice : CORINNE ANDRE
• Direction : COLETTE DEMUYNCK
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Clermont-Ferrand 2

Résumé

Ce travail s'inscrit dans le cadre d'un programme de recherche concernant l'utilisation d'enzymes, transcetolase et aldolase, pour la creation de liaisons c-c en synthese organique. Nous avons cherche a synthetiser, via une enzyme la transcetolase, des analogues du d-fructose et du l-sorbose modifies en position 4. Pour cela, nous avons, dans un premier temps, isole par synthese chimique totale le 4-desoxy-d-fructose et pu montrer que cette molecule est substrat de l'hexokinase et de la phosphoglucose isomerase, enzymes intervenant dans le mecanisme de la glycolyse, mais aussi de la glucose-6-phosphate deshydrogenase. Nous avons ensuite cherche a obtenir les hydroxybutyraldehydes substrats optiquement purs afin de pouvoir realiser les syntheses enzymatiques. Trois voies de syntheses ont ete decrites a partir de molecules de depart chirales. Nous retiendrons la methode developpee avec l'acide d-isoascorbique puisque qu'elle permet egalement l'introduction en position 4 d'autres groupements fonctionnels. Nous avons ainsi obtenu, en utilisant comme precurseurs l'acide d-isoascorbique et l'acide l-ascorbique des aldehydes purs avec de bons rendements et possedant en position 4 un atome d'hydrogene ou un groupement -och#3. Les tests enzymatiques realises avec la transcetolase n'ont cependant pas donne des valeurs d'activite permettant d'envisager des syntheses enzymatiques dans des conditions acceptables. En revanche, les activites mesurees avec la fructose-1,6-bisphosphate aldolase ont fait apparaitre que ces molecules etaient de bons substrats pour cette enzyme. Des syntheses enzymatiques ont donc ete realisees avec l'aldolase et ont permis d'isoler quatre nouveaux derives originaux d'heptulose-1-phosphate.