Contribution à l'étude des paramètres physico-chimiques de l'interaction CETP-HDL3

par Bouchra Lemkadem

Thèse de doctorat en Biochimie

Sous la direction de Yves Malthiery.

Soutenue en 1997

à Angers .

mots clés

• Biochimie analytique, structurale et metabolique
• Lipoproteine hdl
• Propriete physicochimique
• Proteine transport
• Interaction moleculaire
• Biophysique
• Couche monomoleculaire
• Lipide
• Complexe moleculaire
• Lipoprotein hdl
• Physicochemical properties
• Carrier protein
• Molecular interaction
• Biophysics
• Monolayer
• Lipids
• Molecular complex
• Protéines de liaison
• Cholestérol -- Métabolisme
• Lipoprotéines de haute densité

Résumé

Une étape importante du transport inverse du cholestérol nécessite l'interaction des lipoprotéines de haute densité (HDL) et de la protéine de transfert des esters de cholestérol. Le but de ce travail est d'analyser les paramètres qui régissent cette interaction. Dans un premier temps, nous avons procédé à une étude physique des HDL3. L'utilisation de la balance à film et de la technique de monocouches nous a permis de montrer que l'étalement des HDL3 à l'interface air/eau provoque leur déstabilisation et la libération du contenu de leur noyau. Le film obtenu est composé de lipides et d'apolipoprotéines et son comportement est principalement géré par les apolipoprotéines et par les interactions existant entre apolipoprotéines-lipides. L'expulsion des apolipoprotéines à partir du film HDL3 est pression-dépendante et s'accompagne de l'expulsion des lipides. Ces résultats sont confirmés par l'analyse du film obtenu à partir de l'étalement des HDL3, à différents niveaux de compressions, par microscopie de force atomique. La technique de monocouches nous a aussi permis de montrer que l'adsorption de la CETP aux monocouches formées de phospholipides (PL) extraits d' HDL3 est dépendante de la pression de surface de celles-ci. De même l'affinité de la CETP vis à vis des monocouches mixtes formées de phospholipides et du cholestérol libre (CL) ou de phospholipides, du cholestérol libre et du cholestérol estérifié, apparait meilleure comparée à celle vis à vis des monocouches de phospholipides seuls. Une technique récente utilisant les biocapteurs (la technologie BIA : biomolecular interaction analysis) révèle une faible interaction CETP- HDL3 et suggère que la CETP favorise la formation d'un complexe de collision entre HDL3 et LDL dans lequel les LDL seraient localisées au centre. L'importance des interactions apolipoprotéines-lipides constituant les HDL3, dans l'interaction CETP- HDL3 a été testée lors de la glycation in vitro des HDL3. En effet la glycation in vitro des HDL3 induit une augmentation de l'activité de la CETP. Ce changement serait dû à une diminution de la cohésion des complexes apolipoprotéines-lipides qui retentirait sur l'intégrité structurale des HDL3.

Titre traduit

Contribution to the study of the physico-chemical parameters of the CETP- HDL3 interaction

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