Etude fonctionnelle de la stromelysine-3, une metalloprotease matricielle impliquee dans la progression cancereuse

Functional study of stromelysin-3, a matrix metalloproteinase implicated in cancer progression

• Auteur / Autrice : MARIA SANTAVICCA
• Direction : P. BASSET
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

La stromelysine-3 (st3) est une metalloprotease matricielle (mmp) exprimee dans le stroma de nombreux carcinomes. Elle se distingue des autres mmps par des proprietes fonctionnelles inhabituelles. En immunisant des souris avec de la st3 produite dans un systeme procaryotique, nous avons obtenu une serie d'anticorps monoclonaux. L'un d'eux (5st-4a9) est utilise en immunohistochimie semi-quantitative afin de determiner le taux d'expression de la st3 sur des coupes minces de carcinomes mammaires et ainsi evaluer la valeur pronostique de l'expression de la st3. Des etudes anterieures ayant montre que la st3 ne degradait aucun des constituants majeurs de la matrice extracellulaire, nous avons entrepris d'identifier les determinants proteiques susceptibles d'etre responsables de ce comportement insolite. En ayant recours a des experiences de mutagenese dirigee, nous avons demontre que la st3 de souris acquiert une activite proteolytique a condition d'etre deletee d'au moins 175 acides amines a son extremite c-terminale. Pour observer des activites proteolytiques comparables avec la st3 humaine, il est necessaire de proceder a une mutagenese supplementaire dans laquelle le residu alanine en position 235, caracteristique de la st3 humaine et localise au niveau du met-turn, est remplace par une proline. La st3 differe egalement des autres mmps en ce qui concerne l'activation de sa proforme. Nous avons montre que la st3 etait secretee sous une forme potentiellement active, ayant perdu son prodomaine n-terminal. Ce comportement particulier est associe a un mecanisme moleculaire inedit pour une mmp. Nous avons localise dans le prodomaine de la st3, une sequence de dix acides amines comportant un site de reconnaissance et de clivage par la furine, une proproteine convertase presente dans le reseau trans-golgien. A l'aide de transfectants cellulaires stables et transitoires, nous avons teste et confirme la capacite de la furine a activer la st3