Contribution a l'etude du role des flavonoides chez les legumineuses

Contribution to the study of the roles played by the flavonoids in the leguminous plants

• Auteur / Autrice : BENEDICTE CHARRIER
• Direction : P. RATET
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Ce travail de these est une contribution a l'etude des flavonoides, de leur role et des genes qui sont responsables de leur synthese dans la luzerne. L'etude de la partie de la voie de biosynthese des flavonoides dans laquelle la f3h et la dfr interviennent n'avait jamais ete abordee auparavant chez les legumineuses. En plus de caracteriser deux genes de f3h, nous avons etudie leur expression ainsi que celle des genes dfr dans differents organes de luzerne. Nous avons montre que les genes de f3h et dfr sont exprimes dans les fleurs et dans les nodosites. En plus, nous avons montre que le gene dfr s'exprime dans les feuilles de luzerne, alors que le gene f3h ne l'est pas. La regulation de ces deux genes semble egalement differente de celle des genes chs, indiquant que la regulation de l'expression de cette partie de la voie de biosynthese est active. Du fait que la f3h est codee par un gene unique chez de nombreuses especes, et qu'en terme de regulation elle occupe une position cle dans la voie de biosynthese des flavonoides, la construction de fusion du promoteur f3h avec le gene rapporteur gus et l'etude de l'expression de cette fusion dans nicotiana benthamiana ont constitue l'obtention d'une fusion modele pour l'etude de la regulation de la voie de biosynthese des flavonoides. Nous avons cherche a obtenir des mutants de flavonoides chez la luzerne en utilisant la strategie anti-sens. Un clone de chevelu racinaire de medicago truncatula a ete obtenu, qui montre un niveau de transcrits chs diminue de 90% par rapport aux clones controles. Cette modification ne semble avoir aucune influence sur la production de flavonoides, ni sur l'expression des autres genes de la voie de biosynthese des flavonoides. D'autre part, la regeneration de plantes m. Sativa ssp varia transformees avec les constructions anti-sens a revele que cette plante presente des aberrations phenotypiques et d'integration d'adn-t dans nos conditions experimentales, ne permettant pas l'obtention de mutants de flavonoides