Role des boites carg et de la proteine srf au cours de la differenciation myogenique

Role of the carg boxes and of the srf protein during myogenic differentiation

• Auteur / Autrice : MARIELLE SOULEZ
• Direction : Axel Kahn
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Les sequences carg, de consensus cc(a/t)#6gg, sont presentes dans les regions regulatrices de genes de specificite differente des genes repondant precocement aux facteurs de croissance et des genes musculaires et sont impliquees dans l'activite specifique de ceux-ci. Le double jeu des sequences carg constitue un modele d'etude des mecanismes de regulation transcriptionnelle. L'activation transcriptionnelle en reponse a la stimulation par le serum a ete tres bien etudiee dans le cas du proto-oncogene c-fos. Celle-ci depend d'une sequence active en cis appelee sre (serum response element) qui comprend en son centre une boite carg et d'un facteur actif en trans, la proteine srf (serum response factor) qui se fixe au sre sous forme de dimere. Nous avons etudie ex vivo le mode d'action des boites carg dans l'activation transcriptionnelle specifique du muscle et l'implication de la proteine srf au cours de la differenciation myogenique. Les resultats marquants de ce travail sont les suivants: des multimeres de la boite hca1 (boite carg proximale du gene d'-actine cardiaque) sont capables de conferer a un promoteur minimum limite a une boite tata une forte activation transcriptionnelle specifiquement dans les cellules musculaires. Aucune combinaison specifique de sequences d'adn fixant d'autres facteurs transcriptionnels n'est donc requise pour cette activation. Les boites carg exercent leur role activateur tres tot lors de la differenciation myogenique. Cet evenement fut etudie lors de la conversion des cellules fibroblastiques c3h10t1/2 en cellules myogeniques apres traitement par un agent demethylant, la 5-azacytidine. La fixation de la proteine srf sur les boites carg de genes musculaires est impliquee dans leur activation transcriptionnelle. La proteine srf est necessaire a la proliferation des myoblastes, a la differenciation des myoblastes en myotubes plurinuclees et a l'expression de la proteine myod