Implication de la region c-terminale du pf4 dans la regulation negative de la megacaryocytopoiese et dans l'acceleration du recouvrement hematopoietique chez la souris traitee par 5-fluorouracile

Involvement of the carboxy-terminal region of pf4 in the negative regulation of megakaryocytopoiesis and in the enhancement of the hematopoietic recovery of 5-fluorouracil treated mice

• Auteur / Autrice : ISABELLE LEBEURIER
• Direction : Zhong Chao Han
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Le facteur plaquettaire 4 (pf4), une heparin-binding protein specifique de la lignee megacaryocyte (mk) plaquette impliquee dans la regulation negative de la megacaryocytopoiese. Nous avons precedemment montre que le pf4 et une molecule apparentee, la -thromboglobulin (-tg) inhibaient la croissance de la lignee erythroleucemique humaine (hel). Le but de ce travail a ete d'etudier l'effet du pf4, de la -tg et de peptides apparentes sur la croissance de differentes lignees leucemiques humaines et sur la megacaryocytopoiese murine pour determiner une specificite d'action et les relations pouvant exister entre l'activite inhibitrice et la structure du pf4 et de ses molecules apparentees. Les resultats ont montre que le pf4 et la -tg conservaient leur activite inhibitrice sur la croissance de la lignee meg-01. De plus, les peptides dimeriques correspondant a la region 1-24 (c1-24) et 13-24 (c13-24) c-terminale du pf4, mais pas ceux correspondant a la region 16-24 (c16-24), 21-29 (p-tg) et 20-28 (pil-8) c-terminale du pf4, de la -tg et de l'il-8, inhibaient les lignees megacaryoblastiques. Le peptide c13-24 de forme monomerique (c13-24m) et/ou mutee (c13-24a) pour laquelle la cysteine a ete remplacee par une arginine, n'a pas retenu l'activite inhibitrice du pf4. De meme, les peptides c1-24 et c13-24 ont revele une activite inhibitrice in vitro et in vivo sur la megacaryocytopoiese murine contrairement au peptide c1-13. Cette activite inhibitrice peut etre neutralisee par addition d'heparine. Ces resultats suggerent que le domaine responsable de l'activite inhibitrice du pf4 serait localise dans sa region 13-24 c-terminale incluant en partie le domaine de liaison a l'heparine. Une structure dimerique semblerait necessaire a l'activite des peptides. D'autre part, le pretraitement par le pf4 et/ou le peptide c13-24de permettrait d'augmenter le recouvrement des cellules souches et des progeniteurs hematopoietiques chez des souris traitees par 5-fluorouracile