Etudes cellulaire et moleculaire de la biogenese des granules de secretion (trichocystes) de la paramecie

Molecular and cellular studies of the biogenesis of paramecium secretory granules (trichocysts)

• Auteur / Autrice : MARIE-CHRISTINE GAUTIER
• Direction : Linda Sperling
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

La paramecie, comme d'autres cilies, possede un systeme de secretion regulee qui lui permet d'elaborer les trichocystes, organites de defense contre certains predateurs. Les trichocystes sont des vesicules de grande taille qui renferment un veritable cristal de proteines constitue par une famille heterogene de petites proteines immunologiquement apparentees. Des travaux anterieurs proposaient que l'assemblage de ce contenu etait sous le controle d'une maturation proteolytique de precurseurs qui, eux, ne cristallisent pas. Dans une premiere partie, j'ai etudie la synthese et la maturation proteolytique de ces proteines. J'ai mis au point une methode originale de marquage court avec chasse qui m'a permis d'apporter une preuve directe que les polypeptides qui cristallisent derivent de precurseurs par maturation proteolytique. L'analyse de divers mutants de biogenese des trichocystes a confirme l'hypothese que cette maturation proteolytique controle la morphogenese des granules de secretion: la perturbation directe ou indirecte du processus a pour consequence l'absence de trichocystes ou la presence de trichocystes non fonctionnels de forme anormale. Dans une seconde partie, le clonage et la caracterisation de genes codant pour des precurseurs a ete entrepris. Trois genes complets ont ete isoles et sequences. L'analyse des sequences proteiques suggere que les proteines de la matrice cristalline, bien que possedant des structures primaires differentes, auraient un meme repliement de la chaine polypeptidique. Par ailleurs, ce travail a revele que les proteines de la matrice des trichocystes sont codees par une famille de genes coexprimes. La microheterogeneite proteique assuree par cette grande famille multigenique pourrait etre necessaire a la morphogenese d'un organite ayant une forme hautement contrainte