Génétique des maladies peroxysomales : sélection de révertants spontanés a partir de fibroblastes d'un malade atteint de refsum infantile et approche a l'étude de la régulation des fonctions peroxysomales

Peroxisomal genetic diseases: isolation of revertants of an infantile refsum disease cell line and approach to the study of the peroxisomal functions regulation

• Auteur / Autrice : EL BACHIR BIOUKAR
• Direction : Jean Deschatrette
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Les maladies peroxysomales a deficits biochimiques multiples, syndrome de zellweger, adrenoleucodystrophie neonatale et la maladie du refsum infantile (ird), sont caracterisees par une absence de structures peroxysomales normales et un deficit des fonctions qui leur sont associees. Nous avons mis au point un systeme selectif permettant de distinguer les cellules temoins des cellules de malades. Ce systeme porte sur la sensibilite elevee des cellules de malades par rapport aux cellules d'individus temoins a l'acide erucique, substrat de la -oxydation peroxysomale. Des clones revertants stables a partir des cellules d'un malade ird ont ete selectionnes sur le critere de leur resistance a l'acide erucique. Dans ces cellules, les fonctions peroxysomales testees ont ete retablies. De meme les peroxysomes ont ete detectes morphologiquement par des experiences d'immunocytofluorescence. Le faible taux de transfection de ce type cellulaire et la senescence de ces lignees non immortalisees n'ont pas permis de mener a bien le projet d'identifier les genes dont les mutations sont responsables de ces maladies. Des amenagements possibles des protocoles utilises sont proposes afin de contourner ces obstacles. Pour mieux comprendre les heterogeneites et differences d'expression tissu-specifiques des fonctions peroxysomales decrites dans les maladies etudiees, une fusion a ete realisee entre des cellules de l'hepatome de rat fao et des fibroblastes d'individus temoins, caracterises respectivement par des niveaux d'expression eleves et faibles des fonctions peroxysomales. Les resultats obtenus montrent que les fonctions peroxysomales obeissent aux memes regles d'expression (extinction et reexpression) que les fonctions differenciees dans les hybrides somatiques et que leur re-expression, au meme titre que les fonctions specifiques de la differenciation hepatique, est correlee a la segregation du chromosome 2 humain