Detection des microsporidies intestinales enterocytozoon bieneusi et encephalitozoon intestinalis, parasites opportunistes des patients atteints de sida. Nouvelles approches diagnostiques

Detection of intestinal microsporidia, enterocytozoon bieneusi and encephalitozoon intestinalis, opportunistic parasites in aids patients new diagnostic methods

• Auteur / Autrice : CECILE MARECHAL OMBROUCK
• Direction : Isabelle Desportes
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Les microsporidies intestinales sont reconnues comme etant les principaux agents responsables de diarrhee chronique severe chez les sujets infectes par le virus de l'immunodeficience humaine (vih), leur taux de prevalence atteignant 39%. Les deux especes responsables sont enterocytozoon bieneusi et encephalitozoon intestinalis. La tres petite taille des spores de ces parasites explique les difficultes rencontrees lors de leur detection. La mise au point de techniques de diagnostic sensibles et specifiques de ces nouveaux agents pathogenes a suscite un effort particulier sur le plan international. Notre travail s'est inscrit dans cet objectif. Nous avons entrepris deux demarches : 1. La recherche d'anticorps specifiques des microsporidies intestinales dans le serum des patiens vih+ ayant une microsporidiose intestinale. Nous avons mis en evidence la presence d'anticorps diriges contre enc. Intestinalis chez des patients vih+ infectes par enc. Intestinalis pourtant severement immunodeprimes. Les antigenes du filament polaire, identifies par immunocytochimie, presentent un interet particulier car ils sont reconnus par le serum de ces patients comme par celui de donneurs de sang. Ces resultats suggerent l'existence d'encephalitozoonoses dans la population immunocompetente. 2. La mise au point d'une technique de detection des spores dans les selles de ces patients. Nous proposons deux nouvelles methodes de diagnostic qui, par leur specificite et leur sensibilite, sont complementaires des techniques deja existante. Il s'agit d'une part, d'une technique de double marquage, combinant une reaction d'immunofluorescence indirecte classique avec un serum polyclonal anti-enc. Intestinalis et le marquage a l'uvitex 2b, et d'autre part, d'une technique de pcr directement applicable dans les selles des patients. Cette deuxieme technique, aussi sensible que les techniques classiques, permet en plus la differenciation des deux especes de microsporidies.