Recherche Avancée

Thèse soutenue

Microspectrofluorimétrie in situ : développement, mise au point et études intracellulaires d'interactions moléculaires

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Auteur / Autrice : Cyril Favard
Direction : Paul Vigny
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biophysique moléculaire
Date : Soutenance en 1996
Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

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Dans le domaine des spectroscopies optiques et magnétiques, différents dispositifs ont été développés afin d'obtenir un signal provenant de cellules vivantes isolées. Le microspectrofluorimètre laser confocal construit par la société DILOR S. A. , mis au point et développé conjointement avec le laboratoire est un de ces dispositifs. Ses caractéristiques permettent d'obtenir des images spectrales bidimensionnelles. Ce microspectrofluorimètre a été utilisé dans deux types d'études. L'une concerne la pénétration et la localisation du bromure d'éthidium (BET), un intercalant des acides nucléiques, dans des glandes salivaires de drosophila melanogaster. L'autre porte sur la pénétration et la localisation d'un peptide chimère immunogène, issu du peptide de fusion du virus de la rougeole et d'un épitope T du virus respiratoire syncytial, à l'intérieur de cellules macrophagiques de souris. Le microspectrofluorimètre a ainsi permis de montrer l'existence d'une forte proportion de BET non-intercalé dans le noyau des cellules de glandes salivaires, alors que ce marqueur est totalement engagé dans des interactions moléculaires dans le cytoplasme. Il a aussi permis de montrer la pénétration et la localisation cytoplasmique du peptide chimère dans les cellules immunocompétentes.