Regulation transcriptionnelle de l'expression du gene de l'apolipoproteine aii

Transcriptional regulation of apolipoproteine aii gene expression

• Auteur / Autrice : ESTHER FOURNIAT
• Direction : Philippe Cardot
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

L'etude de la regulation du gene de l'apolipoproteine aii (l'apoaii) humaine est un des axes important de recherche dans la lutte contre l'atherosclerose. Le promoteur du gene de l'apoaii humaine a ete caracterise. Nous avons montre anterieurement que la transcription du gene de l'apoaii etait controlee par de nombreux elements regulateurs de a a n compris entre -33 et -911pb. Les elements distaux n, l et k et les elements proximaux ab sont essentiels pour la transcription du gene rapporteur dans les cellules hepg2. Dans cette etude, nous avons d'abord caracterise les proprietes enhancer de la region distale de n a i. La transcription du gene rapporteur cat est augmentee de 10 fois, dans un systeme homologue ou heterologue, et cela quelque soit l'orientation de la region distale. De plus, la region proximale ab communique avec l'enhancer en augmentant de facon synergique la transcription du gene rapporteur, de 8 a 6 fois dans un systeme homologue ou heterologue. Nous avons ensuite realise des experiences de retard sur gel et nous avons montre que 4 activites se liaient sur l'element ab: aiiab1, aiiab2 (ciiib1) et aiiab3/4. Des experiences d'interference de liaison a l'adn par modification des residus g et t ont permis de determiner avec precision les sites de liaison pour ciiib1 et aiiab3/4 qui sont respectivement -51 a -61 et -36 a -44. De plus le site de liaison de aiiab1 recouvre celui de ciiib1 et aiiab3/4. Des mutations sur l'element ab qui abolissent specifiquement la liaison de ciiib1 ou d'aiiab3/4 montrent que la synergie entre l'element distal et l'element proximal ab est due a la liaison de ciiib1. Ce facteur transcriptionnel semble jouer un role determinant dans l'expression hepatique de l'apoaii. Nous avons montre que la region -911/+29 que nous etudions in vitro reproduisait le tissu specificite d'expression de l'apoaii chez des souris transgeniques. Le transgene est exprime dans des quantites significatives uniquement dans le foie des souris transgeniques