Recherche Avancée

Thèse soutenue

Contrôle de l'expression de gènes zygotiques précoces chez l'embryon d'oursin

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Auteur / Autrice : Christian Ghiglione
Direction : Christian Gache
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences de la vie
Date : Soutenance en 1996
Etablissement(s) : Nice
Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université de Nice-Sophia Antipolis. Faculté des sciences
Jury : Président / Présidente : François Cuzin
Examinateurs / Examinatrices : Christian Sardet
Rapporteurs / Rapporteuses : Michel Philippe, Michel Piovant

Résumé

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Nous étudions la phase précoce du développement de l'embryon d'oursin avec des méthodes classiques et moléculaires. Nous analysons plus particulièrement la fonction, la structure et la régulation de deux gènes exprimés pendant la phase de segmentation. Ces gènes codent pour deux enzymes : i. L'enzyme d'éclosion (HE) qui est sécrétée pour digérer l'enveloppe protectrice qui protège l'embryon dès la fécondation. C'est une protéase qui appartient à la famille des métalloprotéases spécifiques de la matrice extracellulaire. Ii. La protéase BP10, homologue à BMP-1 (impliquée dans la morphogénèse des os chez l'homme) et tolloid (qui joue un rôle dans l'établissement de l'axe d-v chez l'embryon de drosophile). La fonction exacte de BP10 n'est pas connue, mais elle pourrait être impliquée dans la morphogénèse. Les deux gènes et leur cDNAs ont été clonés et séquencés. Leur expression au cours du développement normal est strictement zygotique, précoce, transitoire, contrôlée au niveau transcriptionnel et limitée au territoire présomptif de l'ectoderme. L'activation de la transcription est indépendante des contacts entre cellules et donc essentiellement autonome. Le lithium inhibe l'activité transcriptionnelle de ces gènes et diminue la taille de leur domaine d'activité, aussi bien dans des moitiés animales que dans des embryons entiers : la frontière du domaine d'expression est progressivement déplacée vers le pôle animal lorsque la concentration en lithium augmente. Par contre l'étendue du domaine d'expression n'est pas affectée par la présence ectopique de micromères, cellules ayant un fort pouvoir inducteur. L'ensemble de nos résultats indique que l'activité des deux gènes est essentiellement dépendante d'informations maternelles spatialement organisées dans l'ovocyte. L'étude du promoteur de HE est en cours et des sites de contrôle importants ont été mis en évidence. Notre projet principal est de caractériser les facteurs de transcription impliqués dans le contrôle spatiotemporel et dans la sensibilité au lithium de HE et BP10.