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Thèse soutenue

Application de la biochimiluminescence aux immunodosages de pesticides dans les fruits, légumes et vins : mise au point d'une méthodologie et d'une instrumentation

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Auteur / Autrice : Véronique Issert
Direction : Philippe Besançon
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biochimie et biologie moléculaire
Date : Soutenance en 1996
Etablissement(s) : Montpellier 2

Résumé

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Les performances des tests elisa, utiles a l'analyse rapide et specifique des pesticides dependent de la specificite de l'anticorps, de la nature des echantillons et des systemes de detection des complexes anticorps-analyte. Ces trois facteurs ont ete abordes dans cette etude qui s'articule autour de trois parties: (1) la comparaison des performances d'une detection biochimiluminescente (systeme luminol/peroxydase/p-iodophenol/h202) associee a l'immunoanalyse de la procymidone dans les vins par rapport a une detection colorimetrique, et l'extension de l'application du test au raisin et a la salade, (2) la production d'anticorps polyclonaux specifiques de la phosalone et (3) l'etude des contraintes instrumentales liees a la luminescence. Apres une optimisation du dosage et de la detection bcl, la luminescence s'est averee plus facile a mettre en uvre et offre une meilleure limite de detection que la colorimetrie, mais sa repetabilite est moins bonne. Les essais preliminaires de dosage de la phosalone ont conduit a une limite de detection de 0,1mg/l dans l'eau. L'etude des parametres instrumentaux influencant la qualite du dosage et realisee sur un luminometre portable monotube, revele la necessite d'une thermoregulation. L'emploi d'un guide de lumiere pourrait permettre de minimiser les erreurs de repetabilite engendrees par des sources heterogenes. Les pertes de lumiere engendrees par ce systeme qui assure une flexibilite de l'appareil pour des mesures deportees n'alterent pas la qualite de la mesure