Analyse cytologique, fonctionnelle et physiologique de Flo1p, une protéine de floculation de ''Saccharomyces cerevisiae''

Cytological, functional and physiological analysis of flo1p, flocculation protein of saccharomyces cerevisiae

• Auteur / Autrice : Muriel Bony
• Direction : Pierre Barre
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie et biologie moléculaire
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Montpellier 2

Mots clés

Mots clés contrôlés

Physiologie

Métabolisme

Analyse

Glycoprotéines

Lectines

Floculation

Relations structure-activité

Saccharomyces cerevisiae

Résumé

La floculation de la levure saccharomyces cerevisiae est un phenomene d'agregation cellulaire asexuelle ca#2#+-dependante, faisant intervenir une interaction proteine-sucre a la surface des cellules. Afin de mieux comprendre les mecanismes moleculaires impliques dans ce type d'agregation cellulaire, le produit d'un des genes dominants de floculation, le gene flo1, precedemment clone et sequence, a ete etudie. Une approche immunologique combinant l'immunomicroscopie electronique et le fractionnement cellulaire, a permis de localiser la proteine flolp a la surface au niveau de la membrane plasmique et de la paroi de la levure. L'analyse fonctionnelle de flo1p a permis de definir un modele d'adressage et d'organisation de la proteine a la surface des levures et de montrer que flo1p est une proteine de haut poids moleculaire (>200 kda), n- et o-glycosylee. La proteine flo1p mature est liee de maniere covalente aux glucanes parietaux, ceci necessite un ancrage transitoire a la membrane plasmique via un glycosyl phosphatidylinositol fixe a son extremite c-terminale. Les nombreuses sequences repetees de flo1p joueraient un role important en permettant d'allonger la proteine et d'exposer la region n-terminale de flo1p, site actif probable de la proteine, a la surface cellulaire. Cette region presente des caracteristiques structurales communes avec les lectines de legumineuses. Des essais in vitro ont permis de montrer que flo1p etait impliquee dans une activite lectine. L'ensemble de ces resultats suggerent que flo1p est la lectine de floculation. Les suivis immunologiques de flo1p lors de la croissance des levures revelent que c'est la disponibilite de la proteine a la surface qui determine la floculation. Une etude plus generale a montre que la plupart des souches floculantes expriment a leur surface des proteines homologues a flo1p