Etude fonctionnelle des collagènes FACITs par expression de protéines recombinantes

Recombinant facit collagens. Used as models of assembly

• Auteur / Autrice : Claire Giry-Lozinguez
• Direction : Michel Van Der Rest
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Lyon 1
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Michel Van Der Rest

Mots clés

Mots clés contrôlés

Protéines recombinées

Dynamique moléculaire

Plasmides

Triple-hélice

Collagène

Résumé

Les collagenes sont des proteines structurales de la matrice extracellulaire possedant un ou plusieurs domaines en triple helice. Ce sont des molecules homo ou heterotrimeriques. Lors de la formation d'une molecule de collagene, les trois chaines s'assemblent par leur extremite c-terminale, et ka triple helice progresse jusqu'a l'extremite n-terminale, a la maniere d'une fermeture a glissiere. Les evenements initiaux qui regissent ces processus sont encore meconnus (reconnaissance des chaines, selection). Nous avons etudie les parametres de l'assemblage des collagenes facits (ix, xii, xiv et xvi), qui sont caracterises par des domaines collageniques courts (col) interrompus par des domaines non collageniques (nc). Nous avons en particulier construit des chaines recombinantes du collagene ix, heterotrimerique, et avons etudie leur assemblage dans un systeme d'expression eucaryote. Les resultats obtenus montrent que la selection des chaines est assuree par les domaines col1 et nc1, et d'autre part par l'intervention de facteurs cellulaires. De plus, la concentration des chaines dans le reticulum endoplasmique semble etre un facteur determinant pour leur assemblage trimerique. La fonction des collagenes facits est a ce jour inconnue. Nous avons privilegie une approche par domaine de la fonction de ces collagenes. Pour cela, nous avons surproduit le domaine nc1 du collagene xiv de poulet dans un systeme bacterien. Nous montrons qu'il possede un site de liaison a l'epharine, et que ce site adopte une conformation en helice alpha en presence de son ligand