Caractérisation moléculaire et expression in vivo de la protéine STOP de cerveau de rat, effecteur de la stabilité des microtubules neuronaux

Molecular characterization and in vivo expression of the rat brain stop protein, effector of the neuronal microtubules stability

• Auteur / Autrice : Christophe Bosc
• Direction : Didier Job
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Université Joseph Fourier (Grenoble ; 1971-2015)

Mots clés

Mots clés libres

Biologie

Proteine associee microtubule

Microtubule

Fonction cellulaire

Rat

Surrenale

Lignee cellulaire

Neurone

Embryon

Cervelet

Culture cellulaire

Lignee pc12

Proteine stop

Cd

Microtubule associated protein

Microtubule

Cell function

Rat

Adrenal glands

Cell line

Neuron

Embryo

Cerebellum

Cell culture

Stable tubule only polypeptide

Cd

Résumé

Les cellules nerveuses contiennent une abondance de microtubules stables. La proteine stop (stable tubule only polypeptide) est une proteine neuronale qui s'associe aux microtubules et a la calmoduline. Elle est capable de stabiliser in vitro les microtubules vis-a-vis du froid, de la dilution et de drogues. Le clonage de l'adnc de la proteine stop a montre qu'il s'agit d'une nouvelle proteine, de masse moleculaire 100,5 kda et de pi 9,5. La proteine stop comprend deux domaines composes de motifs repetes distincts: un domaine central de 5 repetitions de 46 acides amines extremement conserves et un domaine carboxyterminal de 28 repetitions imparfaites de 11 acides amines. Elle contient egalement un site potentiel de liaison a un domaine sh3. La transfection de l'adnc de la proteine stop dans des cellules depourvues de microtubules stables au froid montre l'association de cette proteine aux microtubules. De plus, l'expression de la proteine stop peut induire in vivo la stabilite des microtubules au froid et au nocodazole, ainsi que la detyrosination de la tubuline des microtubules. La distribution des arnm de la proteine stop indique que la proteine est abondante dans le cerveau. Dans des cultures primaires de cervelet embryonnaire, les neurones sont fortement marques par les anticorps anti-stop. Des oligonucleotides antisens, correspondant au motif central, entrainent 75% d'inhibition de la differenciation de cellules pc12 traitees au ngf. Ces resultats montrent que la proteine stop doit jouer un role important dans la stabilisation au froid des microtubules neuronaux, dans le controle de leur dynamique et dans la differenciation neuronale