La protéine EB2 du virus Epstein-Barr a un effet qualitatif sur la maturation des ARN précurseurs, et influe probablement sur l'épissage

The post-transcriptional activator of the Epstein-Barr virus has a qualitative effect on the mRNA processing and probably influences the splicing

• Auteur / Autrice : Inca Kusters
• Direction : Alain Sergeant
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : École normale supérieure de Lyon (Lyon ; 1987-2009)

Mots clés

Mots clés contrôlés

ARN -- Modifications posttranscriptionnelles

Épissage (génétique)

ARN messagers

Virus d'Epstein-Barr

Mots clés libres

Molecular processing

Résumé

Les résultats que nous présentons concernent la caractérisation de la fonction de la phosphoprotéine nucléaire EB2 du virus d'Epstein-Barr. Avant d'aborder l'aspect virologique de la fonction d'EB2, nous avons décidé de mettre au point des systèmes modèles dans lesquels l'effet de la protéine EB2 est détectable et reproductible. Nous avons établi des modèles dans lesquels nous avons démontré que EB2 augmente, non transcriptionnellement, l'accumulation cytoplasmique d'ARNs cat contenant un intron excisable (ARNs transcrits à partir du plasmide pBlcat2), partiellement excisable, ou ne contenant pas d'intron. Cet effet est aussi observé pour les ARNs -globine déstabilisés, et pour les ARNs EB2 amputés dans la région codante, ou contenant des codons non sens dans la phase de lecture BMLF1. Nous avons évalué si les ARNs que nous avons quantifiés étaient correctement et précisément épissés, coupés en 3' et polyadénylés. Nous avons étudié d'abord le plasmide pBlcat2. Nos résultats démontrent que la majorité des ARNs cat transcrits à partir du plasmide pBlcat2, bien que polyadénylés, sont de taille plus petite que celle attendue et sont incorrectement épissés. En présence de EB2, les ARNs cat correctement épissés sont majoritaires et polyadénylés. Il semble que, en présence de EB2, les sites proximaux d'épissage 5' soient préférentiellement utilisés avec le site d'épissage 3' de l'intron de T de SV40. Bien que cela reste à démontrer, il se pourrait donc que la fonction de EB2 soit unique et explique tous les résultats que nous avons obtenus. En effet, les précurseurs de ces ARNs surexprimés de manière transitoire, pourraient contenir des sites cryptiques d'épissage dont l'utilisation n'est plus régulée par les protéines cellulaires SR, dont la quantité est limitante dans le noyau, et qui sont connues pour influer sur l'utilisation des sites d'épissage alternatif 5' et 3'. EB2 pourrait alors complémenter ces protéines, et pourrait donc être un équivalent viral des protéines SR.