Régulation de l'activité protéolytique par les inhibiteurs de protéases dans le tractus génital mâle des mammifères : identification des inhibiteurs de protéases à cystéine du tractus génital du bélier
Auteur / Autrice : | Sylvie Peloille |
Direction : | Frédéric Esnard |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Sciences de la vie. Biochimie |
Date : | Soutenance en 1995 |
Etablissement(s) : | Tours |
Jury : | Président / Présidente : Jean-Pierre Müh |
Examinateurs / Examinatrices : Jean-Louis Dacheux, Francis Gauthier | |
Rapporteur / Rapporteuse : Joseph Gabriel Bieth, Ahmed Ouali |
Résumé
Les cellules de Sertoli (cellules testiculaires somatiques) de rat sécrètent de la procathépsine l (précurseur d'une protéase a cystéine), de la cystatine C (inhibiteur spécifique des protéases à cystéine) et de l'alpha2-macroglobuline (inhibiteur non spécifique). La présence de ces molécules à différents niveaux du tractus génital mâle peut être le signe de l'implication de phénomènes protéolytiques au cours de la spermatogénèse. Nous avons voulu caractériser les interactions pouvant prendre place entre la cathépsine l, la cystatine C et l'alpha2-macroglobuline d'origine ovine (système homologue). La purification de ces protéines nous a permis dans un premier temps de déterminer les paramètres cinétiques d'interaction entre les différents partenaires. La cathepsine l est rapidement inhibée par la cystatine C et elle peut aussi être captée par l'alpha2-macroglobuline. De plus, l'enzyme complexée à l'alpha2-macroglobuline est rendue inaccessible aux cystatines. Nous avons pu, dans un second temps, grace à la production d'anticorps, rechercher la présence de ces molécules dans le tractus génital du bélier. La cathépsine l a été mise en évidence dans différentes zones de l'épididyme ovin. Toutefois, aucune activité enzymatique attribuable à cette protéase n'a pu être révélée. En revanche, la cystatine C a été mise en évidence à la fois par immunodétection par mesure de ses propriétés inhibitrices à différents niveaux du tractus génital du bélier. Nous avons également mis en évidence la présence d'alpha-2-macroglobuline aussi bien aux niveaux testiculaire qu'épididymaire