Analyse de l'interaction entre antigenes viraux et anticorps monoclonaux a l'aide de la technologie des biocapteurs

Analysis of the interaction between viral antigens and monoclonal antibodies using biosensor technology

• Auteur / Autrice : Hélène Saunal
• Direction : Marc H. V. Van Regenmortel
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

Ce travail a consiste principalement en une etude approfondie de l'antigenicite du virus de la mosaique du tabac (vmt) grace a la technologie des biocapteurs optiques (biacore, pharmacia). Le vmt est un tres bon modele pour l'etude de differents aspects de l'interaction virus-anticorps. Les virus presentent un degre de complexite antigenique superieur a celui des proteines car leur capside est constituee par l'assemblage de plusieurs monomeres en une structure quaternaire. L'association des sous-unites entre elles est a l'origine de l'apparition de nouveaux epitopes (les neotopes) tandis que d'autres epitopes disparaissent par la denaturation de leurs sites ou parce qu'ils ne sont plus accessibles aux anticorps (les cryptotopes). D'autres epitopes (les metatopes) presents au niveau des sous-unites virales monomeriques sont retrouves au niveau des proteines virales polymerisees. Les specificites d'une trentaine d'anticorps monoclonaux vis a vis de ces differents types d'epitopes avaient ete etudiees par des methodes immunochimiques classiques. Les reactivites de ces anticorps ont ete etudiees a nouveau a l'aide de la technologie biacore qui permet une analyse directe, quantitative et en fonction du temps de l'interaction entre deux molecules tout en preservant leur conformation native. Nos resultats montrent clairement la superiorite de la technology biacore pour l'etudes d'epitopes conformationels dans les proteines virales. Les resultats obtenus par methodes immunochimiques classiques peuvent etre influences par l'adsorption de l'antigene sur le plastic ou sa liaison a un anticorps capteur. L'instrument biacore permet une analyse directe de l'interaction entre deux molecules. Cette technologie a de plus permis une cartographie d'epitopes conformationnels sur la proteine monomerique du virus. Cette carte topologique des epitopes a permis de comprendre le mecanisme d'action de certains anticorps capables de bloquer la decapsidation du vmt