Etude structurale et fonctionnelle de la modification 64 rencontree dans le tarn methionine initiateur de diverses especes de levures et de plantes

Structural and functional studies of modification 64 found in initiator methionine trna from several yeasts and plants species

• Auteur / Autrice : JACQUES HEITZLER
• Direction : G. KEITH
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

Les acides ribonucleiques de transfert (tarn) sont de petites molecules d'acides nucleiques qui se caracterisent par la presence d'un nombre important de nucleosides modifies repartis sur l'ensemble de la molecule. L'un d'entre eux a recemment ete decouvert en position 64 du tarn methionine initiateur (tarn#m#e#t#i) de saccharomyces cerevisiae. Il a ete identifie au laboratoire comme etant une o-b-ribosyl-(1''2')-adenosine-5''-phosphate (ar(p)). Suite a ce resultat, nous avons surtout tente d'approfondir la phylogenie de ce nucleoside hypermodifie et de determiner sa fonction biologique. Pour mener a bien nos travaux, nous avons developpe une methode d'hybridation en dot blot, permettant l'identification et la detection (jusqu'a 20 pg) d'especes pures de tarn. Dans un premier temps, nous avons pu identifier une o-b-ribosyl-(1''2')-guanosine-5''-phosphate (gr(p)) en position 64 des tarn#m#e#t#i de schizosaccharomyces pombe et torulopsis utilis. Ce nucleoside a egalement pu etre mis en evidence dans des tarn#m#e#t#i ou des tarn totaux d'autres especes de levures et de plantes. Il apparait comme un marqueur specifique des tarn#m#e#t#i cytoplasmiques de ces organismes. En plus du gr(p)#6#4, le sequencage complet du tarn#m#e#t#i de s. Pombe nous a permis de reveler huit autres nucleosides modifies presents dans la structure de ce tarn. Enfin, des experiences de traduction in vitro nous ont permis de conclure au role d'anti-determinant tenu par l'ar(p)#6#4 ou le gr(p)#6#4, empechant les tarn#m#e#t#i d'entrer dans les etapes d'elongation de la synthese proteique. L'ar(p)#6#4 ou le gr(p)#6#4 constitue donc un motif structural majeur dans la fonction initiatrice des tarn#m#e#t#i de protistes et de plantes