Propriétés antiprolifératives de polysaccharides solubles sur les cellules musculaires lisses d'aorte de rat

Antiproliferative properties of water-soluble polysaccharides on rat aortic smooth muscle cells

• Auteur / Autrice : Delphine Logeart
• Direction : Jacqueline Jozefonvicz
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Paris 13

Mots clés

Mots clés contrôlés

Polysaccharides

Mutation (biologie)

Dextranes

Myocytes du muscle lisse

Athérosclérose

Résumé

L'activation des cellules musculaires lisses (CML) artérielles (prolifération, migration production de matrice extracellulaire) joue un rôle important dans le développement des plaques athérosclereuses. L'héparine est un mucopolysaccharide sulfate naturel connu pour sa capacité antiproliférative envers les cellules musculaires lisses, mais son mécanisme d'action n'est pas encore élucidé. En outre, sa capacité anticoagulante est trop élevée pour envisager son utilisation dans le traitement de l'atherosclerose. En comparaison avec ce polymère, nous avons testés deux familles de polysaccharides solubles susceptibles d'agir sur les cellules musculaires lisses d'aorte de rat in vitro. Ce sont les dérives semi-synthétiques du dextrane dont les unités glycosyles sont substituées aléatoirement par des fonctions carboxymethyles et benzylamide-sulfonates, ainsi que les fucanes, polysaccharides sulfatés issus de l'algue brune ascophyllum nodosum. Des études sur la croissance cellulaire indiquent qu'une substitution adéquate de fonctions chimiques confère au dextrane la capacité à inhiber la prolifération des cml. Une activité antiproliférative plus élevée est observée pour les fucanes par rapport à l'héparine et aux dérivés du dextrane. Pour tous ces polymères, cet effet est dépendant de la concentration, reversible et non toxique. De plus, les fucanes et les derivés du dextrane possédent une faible activité anticoagulante par rapport à l'héparine. Une relation entre l'activité antiproliferative et la masse molaire a étè mise en évidence. En dessous d'une masse molaire seuil, les chaines saccharidiques sont peu activés, tandis que les longues chaines sont tres efficaces. En outre, par une étude cinétique d'incorporation de thymidine tritiée et par cytofluorimetrie en flux, nous avons montré que de façon analogue à l'héparine, ces polymères agissent sur le cycle cellulaire en bloquant les cellules en phase g#0/g#1. Afin d'étudier le mécanisme d'action de ces polysaccharides sur les cml, nous avons procédé au marquage de ces molécules par des élements radioactifs (#3h et #1#2#5i) et par un substitut fluorescent. Des études par analyse de scatchard ainsi que des experiences de compétition indiquent que seuls les polysaccharides antiproliferatifs interagissent avec des sites membranaires avec une constante de dissociation de l'ordre de 10-8 m. De même, l'internalisation dans les cml est observée pour tous les composés antiproliferatifs fluorescents, avec la même localisation perinucleaire. Les resultats d'autoradiographie et de préparation nucléaire semblent montrer leur rapide internalisation nucleaire. Par chromatographie d'exclusion stérique, nous observons également une dégradation partielle de ces polymères par les cellules. En outre, nous avons étudié l'effet de ces polysaccharides sur la biosynthèse d'un constituant majeur de la matrice extracellulaire, le collagene. Il s'avère que ces composés pertubent la synthèse et le typage des collagenes (type I, III et V) mais sans relation directe avec leur activité antiproliferative. Sous reserve d'etudes complementaires, notamment in vivo, les proprietes biologiques de ces polysaccharides en font des candidats potentiels en pharmacologie, leur interet majeur étant la prévention de la restenose apres angioplastie ou intervention chirurgicale cardiovasculaire