Étude biochimique et moléculaire du facteur de croissance heparin affin regulatory peptide (HARP)

Biochemical and molecular study of the growth factor heparin affin regulatory peptide (HARP)

• Auteur / Autrice : Khalid Laaroubi
• Direction : Denis Barritault
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie, physiologie, pharmacologie moléculaires et cellulaires
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Paris 12

Mots clés

Mots clés contrôlés

Transfection

Néovascularisation

Facteurs de croissance

Héparines

Résumé

Depuis plusieurs annees, notre laboratoire s'interesse aux facteurs de croissance ayant une affinite pour l'heparine. Notre experience dans ce domaine, ainsi que la disponibilite tres recente de differentes techniques d'analyses, nous a amenes a la detection puis a la purification a partir d'extraits de cerveau de buf adulte, d'une nouvelle molecule de 18 kda nommee harp. Nous avons decrit harp comme un facteur de croissance ayant des activites mitogene et neurotrophe. Son activite mitogene a par la suite ete remise en question par certains groupes qui, pour des raisons inconnues n'ont pu la mettre en evidence. Ils pretendaient, sans pourtant le demontrer, que l'activite mitogene de l'harp pourrait etre due a une contamination par du fgf ou par d'autres molecules ayant des proprietes identiques. Dans le but de lever cette controverse, nous avons clone l'adn complementaire de l'harp et apres transfection de cet adn dans des cellules nih 3t3, nous avons etudie les proprietes biologiques de la molecule recombinante ainsi produite. Nous avons montre que la proteine harp recombinante stimulait un grand nombre de cellules, notamment les cellules epitheliales et endotheliales et que cette activite mitogene est modulee par l'heparine. De plus, nous avons etabli dans un modele in vitro le role preponderant de l'harp dans les mecanismes participant a l'angiogenese. L'etablissement de la sequence peptidique de la proteine recombinante biologiquement active a revele l'existence d'une nouvelle forme d'harp, possedant trois acides amines supplementaires du cote n-terminal par rapport a la forme initialement decrite. Cette nouvelle forme moleculaire a ete recemment isolee a partir de surnageant d'une culture primaire de cellules epitheliales de cristallin de buf. Concernant l'implication physiologique et physiopathologique de l'harp, deux etudes ont ete menees au niveau de la prostate et du placenta