Role des proteines de choc thermique (dont dnak/hsp70 et groel/hsp60) dans l'expression des proteines chez escherichia coli

Role of heat shock proteins in dnak/hsp70 and groel/hsp60 in the expression of proteins in escherichia coli

• Auteur / Autrice : ABDELHAMID EL YAAGOUBI
• Direction : B. ROSSIGNOL
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Cette these a ete consacree a l'etude du role des proteines de choc thermique (hsps) d'e. Coli dans l'expression de proteines chez e. Coli. D'abord, nous avons montre que le chaperon dnak/hsp70, chez e. Coli, est implique dans l'exportation de la galactose binding protein, mglb, ainsi que dans la stabilite de son arm mglb. Par ailleurs nous avons localise dnak au niveau des jonctions de bayer (sites d'adhesion des membranes interne et externe chez e. Coli). Alors que groel interagit preferentiellement avec les chaines laterales des acides amines hydrophobes et affiche une interaction moindre avec les acides amines polaires, nous avons montre que groes reduit la specificite de groel pour les acides amines hydrophobes et augmente sa specificite pour les hydrophiles. Cette modulation par groes de l'affinite de groel pour les chaines laterales des acides amines du substrat proteique pourrait avoir une implication importante dans le repliement de proteines. Nous avons montre egalement que l'activite atpase de groel est stimulee specifiquement par la forme liee au ligand de la galactose binding protein d'escherichia coli, tandis ce qu'elle est faiblement affectee par sa forme non liee. Cette interaction est refletee par la stimulation de l'activite atpase de groel par la galactose binding protein. La troisieme partie decrit la purification d'une nouvelle proteine de choc thermique membranaire de 29 kda, chez e. Coli, qui est en cours de caracterisation. La derniere partie decrit la ca racterisation du systeme de transport galactose binding protein-dependant de s. Thyphimurium dont l'expression est etudie dans la premiere partie de la these. Nous avons purifie et caracterise la proteine mgla comme etant une atpase galactose-dependante. Nous avons reconstitue ce systeme de transport de galactose dans des proteoliposomes