Isolement et caracterisation de genes du facteur mpf ; analyse de l'expression de l'adnc suc1 de schizosaccharomyces pombe chez nicotiana tabacum
Auteur / Autrice : | LI-XIAN QIN |
Direction : | Catherine Bergounioux |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie |
Date : | Soutenance en 1995 |
Etablissement(s) : | Paris 11 |
Résumé
La division cellulaire represente un processus fondamental et universel dans l'ontogenese d'organismes unicellulaires et pluricellulaires. Cependant, les connaissances acquises sur les mecanismes moleculaires du controle de la division cellulaire chez les vegetaux superieurs sont encore tres limitees. L'objectif de ce travail etait d'obtenir et de caracteriser des genes du cycle cellulaire chez nicotiana tabacum. Deux approches differentes ont ete utilisees: soit l'obtention de fragments d'adnc par rt-pcr suivie du criblage de banques adnc puis de la caracterisation des adnc, soit l'analyse de la surexpression dans nicotiana tabacum d'un gene, suc1 de schizosaccharomyces pombe, implique dans le cycle cellulaire. Des adnc homologues a des cyclines (ntcyc1), a des cdc2 (ntcdc2-1 et ntcdc2-2), ainsi qu'a suc1 (ntsuc1) ont ete obtenus. Les caracteristiques fonctionnelles de ntcyc1 et ntcdc2 ont ete determinees grace a des experiences en systeme heterologue, basees respectivement sur l'induction de la maturation des ovocytes de xenope et la complementation des souches mutantes cdc28 thermosensibles. L'expression de ces genes a ete analysee au cours du cycle cellulaire. L'emploi d'une methode de transformation via agrobacterium tumefaciens a permis d'etudier les effets de la surexpression de l'adnc suc1 de s. Pombe chez le tabac. Les resultats obtenus suggerent un role possible de proteine suc1 dans la regulation de l'activite kinase de complexe cycline/cdk, chez les vegetaux superieurs