Mise en evidence de l'expression de la proteine a du surfactant pulmonaire (sp-a) dans l'epithelium intestinal

Evidency for expression of pulmonary surfactant protein a (sp-a) in the intestinal epithelium

• Auteur / Autrice : Sandrine Rubio
• Direction : Robert Ducroc
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Les muqueuses gastro-intestinales elaborent a leur surface un materiel riche en phospholipides tensio-actifs analogue au surfactant pulmonaire. L'objectif de ce travail a ete de determiner si la proteine a (sp-a), la plus abondante des proteines du surfactant pulmonaire etait exprimee dans le tube digestif chez le rat. En immunocytochimie, des anticorps anti-sp-a reconnaissent des proteines a la surface et dans le cytoplasme de certaines cellules intestinales mais pas dans les cellules gastriques. Ces anticorps reconnaissent en western blot les formes moleculaires caracteristiques de la sp-a a 26, 32, 38 kda d'une part, 66 et 120 kda d'autre part. Apres alkylation, les formes de 120 kda sont scindees en formes monomeriques caracteristiques. Des transcrits de la sp-a sont amplifies par rt-pcr dans l'intestin, mais pas dans l'estomac. La sequence de ces transcrits est identique dans les deux tissus et ils sont inities au meme promoteur. Par ailleurs, la sp-a est presente dans un materiel secrete par l'intestin du rat, les surfactant-like particles. Au cours de l'evolution, les structures pulmonaires sont apparues dans un groupe de poissons a l'origine a la fois des poissons pulmones et des vertebres terrestres. Dans des preparations d'intestin de carpe, cyprinus carpio, l'anticorps anti-sp-a de rat reconnait en western blot des proteines immunoreactives. Des transcrits peuvent etre amplifies par rt-pcr a l'aide d'oligonucleotides complementaires de la sequence du gene de la sp-a de rat. L'analyse d'une partie de la sequence de ces transcrits revele une grande homologie avec ceux de la sp-a de rat. Ces resultats etablissent que la sp-a est exprimee dans l'intestin de facon constitutive. Ils demontrent la production par certains segments du tube digestif d'un surfactant tres proche en composition du surfactant pulmonaire. Ils montrent l'anciennete evolutive de la sp-a et la possibilite de son apparition en tant que proteine intrinseque du tractus digestif